[发明专利]一种目的蛋白制备方法及其用途有效
| 申请号： | 201210470566.1 | 申请日： | 2012-11-19 |
| 公开（公告）号： | CN103131713A | 公开（公告）日： | 2013-06-05 |
| 发明（设计）人： | 任宏伟;凡复;林昳;章永垒;梁洁 | 申请（专利权）人： | 厦门北大之路生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/81;C07K14/435;A61K38/17;A61P25/04 |
| 代理公司： | 厦门市诚得知识产权代理事务所(普通合伙) 35209 | 代理人： | 赖开慧 |
| 地址： | 361000 福建省厦*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种目的蛋白制备方法及其用途。其制备方法为，目的蛋白核苷酸序列片段的获得；目的蛋白重组表达载体的构建；目的蛋白的诱导表达；纯化；切割；目的蛋白核苷酸序列片段的前面插入单体切割的识别位点；优选可在目的蛋白的核苷酸序列片段上游引入kex2酶切位点，在下游引入盐酸羟胺切割位点；目的蛋白的核苷酸序列片段通过SOE技术获得，并通过引物引入单体切割的识别位点；目的蛋白可以是人神经生长因子，胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽等。制备得到的目的蛋白表达量高、易于纯化、基因表达产物即为目的蛋白单体，不带额外氨基酸残基，既保证了目的蛋白产物良好的生物学活性，也省去了多拷贝的切割成本，纯化简单，易于大量生产。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 目的 蛋白 制备 方法 及其 用途 | ||
【主权项】：
一种目的蛋白的制备方法，其特征是：包括如下步骤，目的蛋白核苷酸序列片段的获得；目的蛋白重组表达载体的构建；目的蛋白的诱导表达；目的蛋白的纯化；纯化产物的切割；所述目的蛋白的核苷酸序列片段的前面插入单体切割的识别位点；优选地，在目的蛋白的核苷酸序列片段上游引入kex2酶切位点，在下游引入盐酸羟胺切割位点；所述目的蛋白的核苷酸序列片段通过SOE技术获得，通过引物引入单体切割的识别位点；优选的，目的蛋白是人神经生长因子，胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽。
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