[发明专利]一种珠芽类魔芋组织培养快繁方法

摘要

本发明属于涉及一种珠芽类魔芋组织培养快繁方法，属植物细胞工程技术领域。本发明方法包括菌苗培养、胚状体诱导、种球诱导、种球成熟培养步骤。本发明通过组培技术，改变外植体的诱导发育、生长途径，通过添加相应的生长调节物质，引导生长发育途径由器官发生途径转向胚状体发生途径，直接通过离体培养获得大量成熟的珠芽魔芋种球。本发明的优点在于：珠芽类魔芋有性繁殖系数高、繁殖周期短、品质不易退化、组培苗移栽程序简单、离体块茎不易感病、易萌发，为工厂化快速生产珠芽类魔芋种球提供了实用技术。

主权项

一种珠芽类魔芋组织培养快繁方法，包括菌苗培养、胚状体诱导、种球诱导、种球成熟培养步骤，其特征在于：(1)无菌苗培养：将珠芽类魔芋植株的幼嫩叶片、叶柄以及丛生芽常规灭菌后，将叶片切成0.5‑1.0cm2，叶柄切成0.8‑1cm长，接种到常规灭菌的苗培养基上，在2000lux光下培养，11h/d，培养温度28±1℃，得到脱毒无菌苗；苗培养基组分及配比为：MS基本培养基+0.2mg/L NAA +0.5mg/L 6‑BA+活性炭0‑3.0g/L，蔗糖30g/L，琼脂6‑8g/L，调pH至5.8‑6.2；(2)胚状体诱导：将步骤(1)获得的脱毒无菌苗，取叶片切成0.5‑1.0cm2，叶柄切成0.8‑1.0cm，接到常规灭菌的胚状体诱导培养基上，在2000lux光下培养，11h/d，培养温度28±1℃，获得珠芽类魔芋胚状体；胚状体诱导培养基组分及配比为：MS基本培养基+0.2mg/L NAA +0.5mg/L 6‑BA +0.1mg/L IAA+0.1‑0.2mg/L ABA+30g/L聚乙二醇，蔗糖30g/L，琼脂6‑8g/L，调pH至5.8‑6.2，或MS基本培养基+0.2mg/L NAA +0.5mg/L 6‑BA，蔗糖30g/L，琼脂6‑8g/L，调pH至5.8‑6.2；(3)种球诱导：将未产生新芽之前的珠芽类魔芋胚状体，转移至常规灭菌的诱导培养基上，在2000lux光下培养，11h/d，培养温度28±1℃，得到珠芽类魔芋幼小种球；种球诱导培养基的组分及配比为：MS基本培养基+0.1mg/L NAA +3.0g/L活性炭+15g/L聚乙二醇，蔗糖30g/L，琼脂6‑8g/L，调pH至5.8‑6.2；       (4)种球成熟培养：将步骤(3)得到的珠芽类魔芋幼小种球转移至常规灭菌的种球成熟培养基上，在2000lux光下培养，11h/d，培养温度28±1℃，当珠芽类魔芋种球上端中间有芽点，直径大小为5mm以上，种球的外观颜色略带褐色时得到成熟分离的珠芽类魔芋种球；种球成熟培养基组分及其配比为：MS基本培养基+0.2mg/L NAA +0.5mg/L 6‑BA +0.2‑1.0mg/LABA或30‑50g/L聚乙二醇，蔗糖30‑50g/L，琼脂6‑8g/L，调pH至5.8‑6.2。