[发明专利]一种α-氨基酸酯水解酶固定化方法有效
| 申请号： | 201210484995.4 | 申请日： | 2012-11-26 |
| 公开（公告）号： | CN103834633A | 公开（公告）日： | 2014-06-04 |
| 发明（设计）人： | 李端华;李进军;叶丽娟;潘佳林;王辂 | 申请（专利权）人： | 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所 |
| 主分类号： | C12N11/08 | 分类号： | C12N11/08;C12N9/18;C12R1/19 |
| 代理公司： | 成都睿道专利代理事务所(普通合伙) 51217 | 代理人： | 陶红 |
| 地址： | 610052 四川省成都*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种获得固定化α-氨基酸酯水解酶的方法；本发明所使用的酶来源于含有重组质粒pET28a-aeh的大肠杆菌BL21(DE3)；所使用的载体为含环氧基活性基团的珠状聚合物；固定化酶活力为550-800U/g，固定化酶活回收率达到52%。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 氨基酸 水解 固定 方法 | ||
【主权项】：
一种α‑氨基酸酯水解酶固定化方法，按如下步骤进行：（1）发酵含有重组质粒pET28a‑aeh的大肠杆菌BL21(DE3)，离心分离获得菌体；（2）将菌体用溶菌酶、DNA酶和RNA酶处理，离心分离获得无细胞裂解液；（3）通过盐析初步去除沉淀杂蛋白和沉淀目的蛋白；（4）将所获得粗酶和处理后的载体按照一定的比例加入含有盐的溶液中，控制体系的温度和pH，进行固定化反应，反应一定时间后，取出用去离子水洗涤至洗涤流出液无酶活力，抽滤去水，获得固定化的α‑氨基酸酯水解酶。
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