[发明专利]一种螺旋藻藻蓝蛋白及其提取方法有效
申请号: | 201210501023.1 | 申请日: | 2012-11-28 |
公开(公告)号: | CN102993297A | 公开(公告)日: | 2013-03-27 |
发明(设计)人: | 刘杨;虞永蕾;钟名其;肖湘;赵永杰 | 申请(专利权)人: | 汕头大学 |
主分类号: | C07K14/795 | 分类号: | C07K14/795;C07K1/30 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞;张庆敏 |
地址: | 515063 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及螺旋藻藻蓝蛋白的提取方法,将螺旋藻粉悬浊液采用反复冻融法结合机械破碎法处理得到螺旋藻细胞破碎液;采用30%和50%硫酸铵溶液分级盐析沉淀螺旋藻细胞破碎液得到藻蓝蛋白粗提液1;加入PEG20000和NaCl进一步沉淀出较高纯度的藻蓝蛋白粗提物;用磷酸盐缓冲液溶解藻蓝蛋白粗提物,制得藻蓝蛋白粗提液2;藻蓝蛋白粗提液2进而用PEG20000/Na2SO4双水相体系萃取,萃取后的下相经过透析除盐可得藻蓝蛋白精提液,冷冻干燥制备藻蓝蛋白成品。本发明提取工艺简单、成本低,适于间歇性和规模化生产加工高纯度、高收率的螺旋藻藻蓝蛋白成品。本发明制得的藻蓝蛋白粗提物可长时间贮存,进一步纯化制备的藻蓝蛋白成品具有良好的抗氧化自由基清除效果和荧光强度。 | ||
搜索关键词: | 一种 螺旋藻 蛋白 及其 提取 方法 | ||
【主权项】:
一种螺旋藻藻蓝蛋白的提取方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)制备螺旋藻粉悬浊液:取螺旋藻粉溶解于磷酸盐缓冲液中,制得螺旋藻粉悬浊液;(2)制备螺旋藻细胞破碎液:将螺旋藻粉悬浊液采用反复冻融法结合机械破碎法处理,离心取上清,得到螺旋藻细胞破碎液;(3)制备藻蓝蛋白粗提液1:采用30%和50%硫酸铵溶液分级盐析沉淀螺旋藻细胞破碎液,透析除盐,得到藻蓝蛋白粗提液1;(4)制备藻蓝蛋白粗提物:将PEG20000和NaCl溶解至藻蓝蛋白粗提液1,配制成PEG20000‑NaCl沉淀体系,静置、离心取沉淀,得到藻蓝蛋白粗提物。
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