[发明专利]清香藤中环烯醚萜类化合物的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及清香藤中环烯醚萜类化合物制备方法和抗炎、抗肿瘤应用,属于医药技术领域.本发明提供的环烯醚萜类化合物的制备方法，其方法为粉碎干燥的清香藤茎，然后利用闪式提取技术，得总提取液,总提取液经大孔树脂柱色谱处理,即得富含环烯醚萜类成分的粗提物；采用正相硅胶柱色谱法分离,筛选富集环烯醚萜类化合物的有效流分,所得有效流分经半制备或制备型HPLC色谱分离，以甲醇-水，乙腈-水或甲醇-乙腈-水为流动相洗脱，得到环烯醚萜类化合物。本发明提供的环烯醚萜类化合物的制备方法简便可靠，提取分离效率高，可操作性强，易于实现工业化大生产，所制备的环烯醚萜类化合物具有抗炎、抗肿瘤活性。

主权项

清香藤中环烯醚萜类化合物的制备方法，其特征在于：方法一：(1)粉碎干燥的清香藤茎，然后利用闪式提取技术，溶剂提取法或超声提取法，采用20%‑95%的乙醇提取，过滤，合并滤液, 减压回收提取液至醇浓度低于5％，得总提取液；     (2)总提取液经大孔吸附树脂柱色谱处理，依次用不同比例的水和醇梯度洗脱，各洗脱部位利用薄层色谱和HPLC 技术，筛选富集环烯醚萜类化合物的有效部位，得到10％ ‑100％醇洗脱下来的流分为环烯醚萜类化合物的有效部位，即得富含环烯醚萜类成分的粗提物；     (3)上述粗提物采用正相硅胶柱色谱法分离，以不同比列的氯仿/二氯甲烷‑甲醇‑水，石油醚‑乙酸乙酯/丙酮或氯仿/二氯甲烷‑甲醇作为洗脱剂洗脱，或反相柱色谱分离，或快速中低压反相柱色谱分离，以甲醇‑水或乙醇‑水梯度洗脱，减压回收溶剂，所得流分利用薄层色谱和HPLC技术，筛选富集环烯醚萜类化合物的有效流分； (4)上述步骤(3) 中所得有效流分经半制备或制备型HPLC 色谱分离，以甲醇‑水，乙腈‑水或甲醇‑乙腈‑水为流动相洗脱，得到环烯醚萜类化合物；方法二： (1) 粉碎干燥的清香藤茎，然后利用闪式提取技术，溶剂提取法或超声提取法，采用20%‑95%的乙醇提取，过滤，合并滤液, 减压回收提取液至醇浓度低于5％，得总提取液； (2)将上述总提取液分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，收集得到乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物，乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物经大孔吸附树脂柱色谱处理，依次用水和醇梯度洗脱，各洗脱部位利用薄层色谱和HPLC 技术，筛选富集环烯醚萜类化合物的有效部位，得到10％ ‑100％醇洗脱下来的环烯醚萜类化合物的有效部位，即得富含环烯醚萜类成分的粗提物；(3)上述粗提物采用正相硅胶柱色谱法分离，以不同比列的氯仿/二氯甲烷‑甲醇‑水，石油醚‑乙酸乙酯/丙酮或氯仿/二氯甲烷‑甲醇作为洗脱剂洗脱，或反相柱色谱分离，或快速中低压反相柱色谱分离，以甲醇‑水或乙醇‑水梯度洗脱，减压回收溶剂，所得流分利用薄层色谱和HPLC技术，筛选富集环烯醚萜类化合物的有效流分； (4)上述步骤(3) 中所得有效流分经半制备或制备型HPLC 色谱分离，以甲醇‑水，乙腈‑水或甲醇‑乙腈‑水为流动相洗脱，得到环烯醚萜类化合物；(5)上述步骤(2)中将剩余水层溶液经活性炭色谱柱，先后利用水(100 ml)洗脱，醇(300 ml)洗脱；将醇洗脱得到的溶液进行浓缩，得到残渣；残渣经CH2N2甲基化后，利用制备薄层色谱法得到环烯醚萜类化合物。