[发明专利]一种小麦遗传转化方法有效
申请号: | 201210505827.9 | 申请日: | 2012-11-30 |
公开(公告)号: | CN102952823A | 公开(公告)日: | 2013-03-06 |
发明(设计)人: | 种康;牛遇达;李春华;张景昱 | 申请(专利权)人: | 中国科学院植物研究所 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;A01H4/00;A01H5/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100093 北京市海淀区香山南*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明公开了一种小麦遗传转化方法,具体来说涉及一种通过抗生素梯度筛选增加小麦遗传转化效率的方法,包括如下步骤:(1)将小麦胚性愈伤组织进行预培养;(2)将含有目的基因和潮霉素抗性基因的表达载体通过基因枪法导入胚性愈伤组织;(3)恢复培养;(4)在筛选培养基上培养35-55天;所述筛选培养基中含有35-45mg·L-1的潮霉素;(5)在含有35-45mg·L-1潮霉素的分化培养基上培养10-20天,得到产生芽点的胚性愈伤组织;(6)在含有15-25mg·L-1潮霉素的分化培养基上培养30-60天,得到小苗;(7)在生根培养基上培养至生根。本发明操作简单易行,转化效率高,转化后所得到小麦幼苗生长状态良好,具有非常大的实际应用价值和市场推广前景。 | ||
搜索关键词: | 一种 小麦 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】:
一种小麦遗传转化方法,包括如下步骤:(1)将小麦胚性愈伤组织进行预培养;(2)将含有目的基因的表达载体通过基因枪法导入完成步骤(1)的胚性愈伤组织;所述表达载体含有潮霉素抗性基因;(3)将完成步骤(2)的胚性愈伤组织进行恢复培养;(4)取完成步骤(3)的胚性愈伤组织,在筛选培养基上培养35‑55天;所述筛选培养基中含有35‑45mg·L‑1的潮霉素;(5)取步骤(4)得到的胚性愈伤组织,在含有35‑45mg·L‑1W潮霉素的分化培养基上培养10‑20天,得到产生芽点的胚性愈伤组织;(6)取步骤(5)得到的产生芽点的胚性愈伤组织,在含有15‑25mg·L‑1潮霉素的分化培养基上培养30‑60天,得到小苗;(7)取步骤(6)得到的小苗,在生根培养基上培养至生根。
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