[发明专利]一种藏药组合物棘豆消痒制剂的质量检测方法

摘要

本发明公开了一种藏药组合物棘豆消痒制剂的质量检测方法。本发明对现有的藏药组合物棘豆消痒制剂质量标准进行了相应提高，改进了原标准中轮叶棘豆和儿茶的鉴别方法，增加了安息香的鉴别方法；增加了制剂中重金属、蓖麻碱的含量检查方法，硫、总黄酮、熊去氧胆酸、麝香酮的含量测定方法，使得藏药组合物棘豆消痒制剂的质量检测更加准确，进一步确保了该制剂的安全有效、质量可控。

主权项

一种原料药组成为轮叶棘豆150重量份、熊胆粉2重量份、麝香1重量份、儿茶50重量份、岩精膏50重量份、胆矾30重量份、硫磺（制）30重量份、蓖麻子50重量份、川西千里光10重量份、安息香10重量份的藏药组合物棘豆消痒制剂的质量检测方法，该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种：鉴别：A.轮叶棘豆的鉴别取藏药组合物棘豆消痒液体制剂，相当于原药材5‑10g，滤过，滤液用二氯甲烷振摇提取2次，每次加二氯甲烷20‑40ml，合并二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇2‑5ml使溶解，作为供试品溶液；或藏药组合物棘豆消痒固体制剂，相当于原药材5‑10g，研细，加水20‑40ml，超声20‑40分钟，滤过，滤液用二氯甲烷振摇提取2次，每次加二氯甲烷20‑40ml，合并二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇2‑5ml使溶解，作为供试品溶液；取轮叶棘豆对照药材1‑3g，加水20‑40ml，煎煮1h，滤过，滤液用二氯甲烷振摇提取2次，每次加二氯甲烷20‑40ml，合并二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇2‑5ml使溶解，作为对照药材溶液；照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B的薄层色谱法进行试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为5‑9:5的环己烷‑乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；喷以体积份数比10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；B.儿茶的鉴别取藏药组合物棘豆消痒液体制剂，相当于原药材5‑10g，滤过，滤液用二氯甲烷振摇提取2次，每次加二氯甲烷20‑40ml，合并二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇2‑5ml使溶解，作为供试品溶液；或取藏药组合物棘豆消痒固体制剂，相当于原药材5‑10g，研细，加水20‑40ml，超声20‑40分钟，滤过，滤液用二氯甲烷振摇提取2次，每次加二氯甲烷20‑40ml，合并二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇2‑5ml使溶解，作为供试品溶液；取儿茶对照药材0.5‑2g，加水20‑40ml，煎煮1h，滤过，滤液用二氯甲烷振摇提取2次，每次加二氯甲烷20‑40ml，合并二氯甲烷液，挥干，残渣加甲醇2‑5ml使溶解，作为对照药材溶液；照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B的薄层色谱法进行试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为4:2‑7:0.4的环己烷‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，展开，取出，晾干；喷以体积份数比10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.安息香的鉴别取藏药组合物棘豆消痒液体制剂，相当于原药材5‑10g，水浴蒸干，残渣加甲醇20‑40ml，超声20‑40分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇1‑3ml使溶解，作为供试品溶液；或取藏药组合物棘豆消痒固体制剂，相当于原药材5‑10g，研细，加甲醇20‑40ml，超声20‑40分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇1‑3ml使溶解，作为供试品溶液；取安息香对照药材0.1‑0.3g，加甲醇5‑10ml，超声20‑40分钟，滤过，滤液水浴蒸干，残渣加甲醇1‑3ml使溶解，作为对照药材溶液；照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B的薄层色谱法进行试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积份数比为4‑8:4:3:0.5的沸程为60‑90℃的石油醚‑正己烷‑乙酸乙酯‑冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点；含量测定：A.重金属的含量限度测定对照品溶液的制备：精密称取30mg硝酸铅，置250ml量瓶中，加体积份数比9.5%‑10.5%稀硝酸2ml溶解后，加蒸馏水至刻度，摇匀，作为标准对照品溶液；标准曲线的制备：精密量取上述对照品溶液0.0、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0ml，分别置100ml量瓶中，编号为1至6号，加去离子水至10.0ml，备用；取空坩埚6只，在550℃灰化3小时，放冷，加体积份数比36~38%浓盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，水浴加热2分钟，冷却后加酚酞指示剂1滴，用氨试液调至微红色，加稀醋酸2ml，分别转移至已备好的1至6号100ml量瓶中，加10μl硫化钠溶液，再加pH3.2的水溶液稀释至刻度，摇匀，静置5分钟，以1号为空白；照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅤA紫外‑可见分光光度法进行试验，在208nm波长处依次测定吸光度；以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；测定法：精密量取藏药组合物棘豆消痒液体制剂1.0‑3.0ml或精密称取藏药组合物棘豆消痒固体制剂1‑3g，置坩埚内，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加体积份数比96~98%浓硫酸1.0ml，使恰湿润，用40‑60℃低温加热至硫酸除尽后，再加体积份数比65~68%浓硝酸1.0ml蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，照标准曲线的制备项下的方法，自“在550℃灰化3小时”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中重金属的含量（μg/ml），计算，即得；B.蓖麻碱的含量测定照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅥD高效液相色谱法进行测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比13‑15:87‑85乙腈‑水为流动相；检测波长为308nm；理论板数按蓖麻碱峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备：取蓖麻碱对照品适量，精密称定，加乙醇制成每lml含20μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：精密量取藏药组合物棘豆消痒液体制剂1.0‑3.0ml或精密称取藏药组合物棘豆消痒固体制剂1‑3g，置具塞的锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，浓缩至干，残渣加水10ml加热使溶解，用氯仿萃取5次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加乙醇溶解并定容至2ml容量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；C.硫的含量测定对照品溶液的制备：精密称取0.15g无水Na₂S0₄，用水溶解后，转入100ml量瓶中，用水定容，得S0₄^2‑的贮备液；临用时，精密量取贮备液10ml，置25ml量瓶中．加水至刻度，摇匀，即得S0₄^2‑对照品溶液；标准曲线的制备：精密量取上述对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置25ml比色管中，编号为1至6号，加水至5.0ml，再加入丙酮2ml，用水稀释至20ml，再加入2ml 30mg/ml的BaCl₂稀盐酸溶液，用水稀释至刻度，摇匀，静置5分钟，以1号为空白；照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅤA紫外‑可见分光光度法进行试验，在460nm波长处测定吸光度；以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；测定法：精密量取藏药组合物棘豆消痒液体制剂1.0‑3.0ml或精密称取藏药组合物棘豆消痒固体制剂1‑3g，置坩埚内，加入2ml质量体积份数比3‑5％Na₂CO₃溶液，搅拌均匀，在电炉上烘干炭化1小时后，移入马弗炉内逐步升温，在500‑550℃下灰化3小时，取出，冷却后加入10ml体积份数比2‑3％盐酸溶液，微火加热10‑20min，过滤，取续滤液5ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，得供试品溶液；精密量取供试品溶液5.0ml，置25ml比色管中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至5.0ml”起，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中硫的含量（μg/ml），计算，即得；D.总黄酮的含量测定对照品溶液的制备：精密称取芦丁对照品10mg，置50ml量瓶中，加乙醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀，即得；标准曲线的制备：精密量取上述对照品液0.0ml、1.0ml、2.0ml、3.0ml、4.0ml、5.0ml，分别置25ml量瓶中，编号为1至6号；各加水至5.0ml，加重量体积份数比4‑5%亚硝酸钠试液1ml，混匀，放置6分钟，加重量体积份数比10‑15%硝酸铝溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以1号为空白；照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅤA紫外‑可见分光光度法进行试验，在500nm波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，对照品浓度为横坐标，绘制标准曲线；测定法：精密量取藏药组合物棘豆消痒液体制剂1.0‑3.0ml或精密称取藏药组合物棘豆消痒固体制剂1‑3g，置具塞的锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，用活性炭脱色5分钟，滤过；精密量取续滤液3.0ml，置25ml量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至5.0ml”起，依法测定吸收度，从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的含量（μg/ml），计算，即得；E.熊去氧胆酸的含量测定照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅥD高效液相色谱法进行测定；色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比75‑80:20‑25甲醇‑体积份数比1%冰醋酸水溶液为流动相；蒸发光散射检测器检测；理论板数按熊去氧胆酸峰计算应不低于2000；对照品溶液的制备：取熊去氧胆酸对照品适量，精密称定，加乙醇制成每lml含0.3mg的溶液，即得；供试品溶液的制备：精密量取藏药组合物棘豆消痒液体制剂0.5‑1.5ml或精密称取藏药组合物棘豆消痒固体制剂0.5‑1.5g，精密量取藏药组合物棘豆消痒制剂1.0ml，置具塞的锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，浓缩至干，残渣加体积份数比1%冰醋酸水溶液10ml使溶解，用乙酸乙酯萃取5次，每次10ml，合并乙酸乙酯液，40℃以下减压蒸干，残渣加乙醇溶解并定容至2ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；F.麝香酮的含量测定照《中华人名共和国药典》2010年版一部附录ⅥE气相色谱法进行测定；色谱条件与系统适用性试验：以体积份数比50%甲基‑50%苯基聚硅氧烷DM‑17为固定相，涂布浓度为2%；柱温180℃；理论板数按麝香酮峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备：取麝香酮对照品适量，加乙酸乙酯制成每1ml含6μg的溶液，即得；供试品溶液的制备：精密量取藏药组合物棘豆消痒液体制剂1.0‑3.0ml或精密称取藏药组合物棘豆消痒固体制剂1‑3g，置具塞的锥形瓶中，精密加入乙醇50ml，密塞，称定重量，超声处理20‑30分钟，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液25ml，浓缩至干，残渣加乙酸乙酯溶解并定容至1ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl，注入气相色谱仪，测定，即得。