[发明专利]一种具有双荧光基团的质粒及其作为标准品的应用

摘要

本发明公开了一种具有双荧光基团的质粒及其作为标准品的应用。本发明提供的质粒，包括表达盒甲和表达盒乙；表达盒甲包括启动子、特异DNA片段甲和终止子；表达盒乙包括启动子、特异DNA片段乙和终止子；特异DNA片段乙为编码序列表的序列3所示的hFluc蛋白的DNA分子；特异DNA片段甲自上游至下游依次包括hRluc1片段、hRluc2片段、特异DNA片段丙、所述hRluc2片段和hRlu3片段；hRluc1片段、hRluc2片段和hRlu3片段顺次连接后编码序列表的序列4所示的hRluc蛋白；特异DNA片段丙中具有终止所述特异DNA片段甲连续编码的终止密码子和多克隆位点。本发明提供的质粒可作为标准品鉴定TALENs的敲除效率，结果更准确可靠。

主权项

一种质粒，包括表达盒甲和表达盒乙；所述表达盒甲包括启动子甲、特异DNA片段甲和终止子甲；所述表达盒乙包括启动子乙、特异DNA片段乙和终止子乙；所述特异DNA片段乙为编码序列表的序列3所示的hFluc蛋白的DNA分子；所述特异DNA片段甲为如下（a）或（b）：（a）自上游至下游依次包括如下元件：hRluc1片段、hRluc2片段、特异DNA片段丙、所述hRluc2片段和hRlu3片段；所述hRluc1片段、所述hRluc2片段和所述hRlu3片段顺次连接后编码序列表的序列4所示的hRluc蛋白；编码所述hRluc蛋白的起始密码子位于所述hRluc1片段上；编码所述hRluc蛋白的终止密码子位于所述hRlu3片段上；（b）自上游至下游依次包括如下元件：hRluc‑X片段、特异DNA片段丙、所述hRluc‑X片段和hRluc‑Y片段；所述hRluc‑X片段和所述hRluc‑Y片段顺次连接后编码序列表的序列4所示的hRluc蛋白；编码所述hRluc蛋白的起始密码子位于所述hRluc‑X片段上；编码所述hRluc蛋白的终止密码子位于所述hRluc‑Y片段上；所述（a）和/或所述（b）中，所述特异DNA片段丙中具有终止所述特异DNA片段甲连续编码的终止密码子；所述特异DNA片段丙中具有多克隆位点。