[发明专利]一种9-羰基-10,11-去氢泽兰酮的快速提取检测方法

摘要

本发明公开了一种9-羰基-10，11-去氢泽兰酮的快速提取检测方法，其步骤：A、样品预处理：采集紫茎泽兰叶片阴干，粉碎；B、甲醇超声一步提取法：称取上述A步骤样品，溶于甲醇，在超声提取器中提取，过滤得到滤液；C、减压蒸干：将上述滤液减压蒸干，得到浸膏，用少量甲醇溶解，用水分散；D、萃取：上述C步骤的甲醇溶液用乙酸乙酯萃取，取上层减压蒸干得到浸膏；E、硅胶柱层析；G、HPLC检测。本发明可靠性高、所用仪器简单、操作方便、检测效率高等优点，适于常规实验室进行标准毒素的制备和分析工作。

主权项

一种9‑羰基‑10，11‑去氢泽兰酮的快速提取检测方法，其特征在于，包括以下步骤：A、样品预处理：采集紫茎泽兰叶片在没有阳光的地方阴干或冻干，然后粉碎；B、甲醇超声一步提取法：称取上述A步骤样品，溶于甲醇，置于40MHz超声提取器或超声波清洗器，在40℃超生提取30min，提取2‑3次，即提取完全，过滤得到滤液；C、减压蒸干：将步骤B所得的滤液在旋转蒸发仪中40℃减压蒸干，得到浸膏，按浸膏与甲醇的用量比为1∶5溶解，待完全溶解加入蒸馏水至甲醇含量为20％进行分散；D、萃取：上述C步骤的甲醇水提液用乙酸乙酯进行萃取，乙酸乙酯的量为甲醇水提液的1/2，取上层减压蒸干得到浸膏；E、硅胶拌样，干法上样进行硅胶柱层析：按浸膏与硅胶H的用量比为1∶1～1∶2，搅拌混合后，加入层析柱后，先用二氯甲烷做洗脱液，洗去低极性杂质；再用二氯甲烷∶乙酸乙酯98∶2(v/v)洗脱，收集洗脱液，减压蒸干得到浸膏；F、过树脂：浸膏溶于甲醇∶水∶三氯甲烷85∶10∶5(v/v/v)溶剂中，上XAD‑2/D101大孔树脂柱洗脱以除去色素等杂质，收集洗脱液，减压蒸干得到粗品，粗品反复硅胶层析，并且分时间段收集洗脱液，薄层色谱法对洗脱液进行分类及合并同类项，展开剂为石油醚∶丙酮/12∶1(V/V)，Rf值为0.45的收集液为所提取物质；G、HPLC检测：上述F步骤所得物质用HPLC进行浓度检测，HPLC条件：C18色谱柱规格为：250mm×4.6mm，5.0μm；流动相为20％‑100％的甲醇；流速为1mL·min‑1；进样量10μL；检测波长为255nm；柱温为25℃；梯度洗脱时间程序为0‑10min。