[发明专利]专性孤雌繁殖的轮虫种群培育方法

摘要

本发明公开一种采用化学药物诱导、微波辐射诱变、紫外照射突变及人工选育专性孤雌繁殖的轮虫种群培育方法，所培育的轮虫种群在繁殖和传代过程中，即使在密度为800~1000只/毫升的培养液中，仍旧进行孤雌繁殖而不发生有性繁殖行为，可显著提高轮虫培养密度、提高轮虫生产效率、缩小养殖水体积、降低生产成本，可应用于室内进行轮虫高密度培养，同时也适合在室外进行轮虫敞池培育增殖，可为水产经济养殖动物的苗种和幼体培育，提供充足的活体饵料生物。

主权项

一种专性孤雌繁殖的轮虫种群培育方法，其特征在于按如下步骤进行：a．取轮虫的休眠卵放置于500毫升的培养液中，置于温度24度，光照3000lx，光周期16：8的环境条件下孵化3~5天；b. 将孵化出来的轮虫进行单个体扩大培养，投喂微绿球藻，投喂密度为100万细胞~200万细胞/毫升培养液，温度24度，光照3000lx，光周期16：8；c. 挑取100只新孵化出的个体分别进行扩大培养，形成100个克隆种群，每个克隆种群培养液体积为2000毫升，每天更新一次培养液及饵料； d．当克隆种群的轮虫密度达到1只/毫升时，向各克隆种群培养液中加入α‑生育酚，加入量为20微克/毫升培养液，继续进行扩大培养，同时每天更新一次培养液及饵料，并维持培养液中α‑生育酚的浓度；当克隆种群的轮虫密度达到3~10只/毫升，将每个克隆种群的轮虫密度浓缩至100只/毫升，同时调整α‑生育酚的浓度为100微克/毫升培养液，培养10~15天；e. 从100个克隆种群中，筛选出25~35个有性生殖比率小于1%的克隆种群，用脉冲频率2450M的微波辐射10秒；12小时后再用强度为1480 µWcm‑2s‑1的紫外线照射60秒；12小时后，将克隆种群的轮虫群密度调整到1只/毫升，培养7天，此期间不添加α‑生育酚；f．重复d步骤的方法培育；g．从25~35个轮虫的克隆种群中，继续筛选出10~15个有性生殖比率小于0.1%的克隆种群，用脉冲频率2450M的微波辐射10秒；12小时后再用强度为1480 µWcm‑2s‑1的紫外线照射60秒；12小时后，将克隆种群的轮虫群密度调整到1只/毫升，培养7天，此期间不添加α‑生育酚；h.重复d步骤的方法培育；i. 从10~15个轮虫的克隆种群中，筛选出种群密度达到800~1000只/毫升仍进行孤雌繁殖的轮虫克隆种群。