[发明专利]一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法

摘要

本发明涉及一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法，该方法通过对大蒜消毒、切割，然后对伤愈组织进行诱导和培养，产生可以作为大批量发酵生产用的伤愈组织细胞种子。该方法可以为工业生产SOD提供高产、耐受性好的优良种子细胞。

主权项

 一种大蒜伤愈组织种子细胞的生产方法，其特征在于，通过以下工艺步骤实现：A、将大蒜在5‑7℃下贮藏25‑30天，然后去除保护叶，用无菌水冲洗带皮的蒜瓣，用70%的乙醇漂洗40‑60秒，再放入0.1%的升汞溶液中浸泡7‑10分钟；B、将A步骤所得蒜瓣用无菌水冲洗2‑3遍，然后将蒜瓣切成3‑8块（视自然蒜瓣的大小而定）的带皮蒜块，尽量做到大小均匀，接种到盛有30ml伤愈组织诱导培养基的三角瓶中，每瓶20‑30块；C、将B步骤的三角瓶在24‑26℃、光照强度500‑700lux的条件下培养，每天循环光照11‑14小时，14‑16天，备用；D、将C步骤所得大蒜伤愈组织细胞按接种到悬浮培养基中进行培养，接种比例按一个三角瓶接种5‑8L悬浮培养基；E、将D步骤接种后的悬浮培养基在25‑30℃，pH值在5‑6，培养6‑8天；F、将E步骤的培养清液按1：10的比例，移种至同样的悬浮培养基中，以25‑30℃，pH值在5‑6，培养6‑8天；G、重复F步骤3‑5次，取样在显微镜下观察细胞形态，当细胞形态整齐一致，且为圆形或椭圆形，即为成品种子细胞。