[发明专利]一种质粒型腺病毒载体pAd-IGF2及其构建方法和应用在审
申请号: | 201210525343.0 | 申请日: | 2012-12-09 |
公开(公告)号: | CN103205462A | 公开(公告)日: | 2013-07-17 |
发明(设计)人: | 陈宏;黄永震;孙雨佳;展召阳;李密杰;蓝贤勇;雷初朝 | 申请(专利权)人: | 西北农林科技大学 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;C12N15/66;C12Q1/68;C12N5/10 |
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地址: | 712100 陕*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | 本发明一种质粒型腺病毒载体pAd-IGF2及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。所述质粒型腺病毒载体pAd-IGF2的构建方法包括:(1)将秦川牛IGF2基因插入pAdTrack-CMV腺病毒穿梭质粒的CMV启动子之下,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-IGF2;(2)Pme Ⅰ线性化后转化含有pAdEasy-l质粒的E.col iBJ5183感受态细胞,利用E.coli BJ5183内Cre重组酶高效的同源重组系统,在细菌中完成pAdTrack-CMV-IGF2和pAdEasy-1的同源重组;将正确的重组腺病毒质粒命名为pAd-IGF2;(3)pAd-IGF2经Pac Ⅰ酶切线性化后,脂质体转染293A细胞和秦川牛原代肌肉细胞,产生并获得重组病毒颗粒。本发明的质粒型腺病毒载体pAd-IGF2具有可应用于秦川牛IGF2基因功能研究、鉴定和对种子细胞进行改造,调控肌肉生长发育相关基因的代谢。 | ||
搜索关键词: | 一种 质粒 病毒 载体 pad igf2 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】:
一种质粒型腺病毒载体pAd‑IGF2,其特征在于:所述质粒型腺病毒载体pAd‑IGF2含有如SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的秦川牛IGF2基因。
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