[发明专利]壬基酚人工抗原的制备方法

摘要

本发明公开了一种壬基酚人工抗原的制备方法，其步骤：(1)按摩尔比称取壬基酚和琥珀酸酐置于反应瓶中，加入DMSO作为溶剂，反应后冷却至室温，将冷却的反应液加入到超纯水中，边滴加边搅拌，溶液变成乳白色，将物质进行抽滤沉淀，用冰超纯水洗涤后抽干，烘干后重结晶，干燥得到的淡黄色油状物;(2)按摩尔比称取N-羟基琥珀酰亚胺：水溶性碳二亚胺：牛血清白蛋白共溶于lPBS中，反应过夜，离心；按摩尔比比例称取NP-HS溶解于N,N-二甲基甲酰胺中，溶解后，取上清液，边滴加边搅拌的方式加入到NP-HS溶液中，将反应后的溶液离心，取上清液，将透析的反应液置于冰箱中冷冻过夜，干燥，得壬基酚人工抗原。该方法合成步骤简单易操作，副反应少，目标物纯度高。

主权项

一种壬基酚人工抗原的制备方法，其步骤是：(1) 按摩尔比1:1.3称取壬基酚和琥珀酸酐置于500ml反应瓶中，加入DMSO作为溶剂，90℃反应1h后冷却至室温 ，将冷却的反应液加入到超纯水中，边滴加边搅拌，溶液变成乳白色，上面浮着一层淡黄色的油状物，将上述物质进行抽滤沉淀，用冰超纯水洗涤后抽干，50℃烘干后重结晶3次，干燥得到的淡黄色油状物为NP‑HS; (2) 按摩尔比30：30：1称取N‑羟基琥珀酰亚胺：水溶性碳二亚胺：牛血清白蛋白共溶于0.01mol/lPBS中，4℃下搅拌反应过夜，将上述溶液离心5000r/min，10min，所得上清液为A液；按摩尔比30:6.5的比例称取NP‑HS溶解于 N,N‑二甲基甲酰胺中，待完全溶解后，用移液枪取1/2体积的上清液A，以边滴加边搅拌的方式加入到NP‑HS溶液中，避光反应3‑5h，将反应后的溶液离心5000r/min，10min，上清液为B，取上清液B，以PBS溶液做透析液，置4℃透析3天，每7‑9h换一次透析液，除去未反应的DMF、CDC、NHS、NP小分子物质，将透析的反应液用棕色玻璃小瓶分装后置于‑40℃冰箱中冷冻过夜，然后转移到冷冻干燥机中进行干燥，获得一种壬基酚人工抗原，于‑20℃冰箱保存。