[发明专利]一种高纯度维生素B12的纯化工艺

摘要

本发明公开了一种高纯度维生素B12的纯化工艺，属于生化产品的分离纯化技术领域。所解决的是现有工艺中存在的产品杂质难以除去、纯度不高技术问题，其特征在于将大孔聚苯乙烯-二乙烯苯微球树脂作为层析填料，装入色谱柱成为固定相，把含有待分离的VB12粗品溶液流过该色谱柱，然后再把吸附在树脂上的VB12洗脱下来，实现VB12和杂质的分离。本发明釆用的树脂吸附量大，选择性好，一次操作可以得到99%以上纯VB12产品，工艺方法简单，生产效率高，具有容易工业化生产、环境污染小等优点。

主权项

一种高纯度VB12的纯化工艺，其特征在于包括下述步骤：1>色谱柱平衡：采用大孔聚苯乙烯‑二乙烯苯微球树脂为层析填料，装入色谱柱作为固定相，装柱完成后，用两倍柱体积去离子水以1～4倍柱体积每小时的流速平衡色谱柱；2>样品制备：称取纯度为85～93%的VB12粗品，加入到去离子水中搅拌溶解完全，使VB12粗品的浓度为5～12.5mg/ml，用滤纸过滤得到样品液备用；3>上样：将步骤2>得到的样品液以1～4倍柱体积每小时的流速连续流过所述色谱柱，所用树脂的体积（L）和样品的重量（g）比为1:10～1:30；4>洗脱：上样结束后，用去离子水冲洗1～4倍柱体积，然后以6.25%的丙酮水溶液为流动相，1～4倍柱体积每小时的流速洗脱，所述洗脱液用高效液相色谱仪检测纯度，将纯度合格的洗脱液合并得到收集液；5>后处理：将步骤4>得到的收集液用纳滤膜浓缩，再经喷雾干燥，得到纯度大于99%的VB12。