[发明专利]穿刺活检组织芯片

摘要

提供一种制备高通量穿刺活检组织芯片的技术和方法。收集42例经乳腺穿刺活检组织病理学检查确诊为乳腺癌的患者的穿刺活检剩余石蜡组织标本，以相应的常规病理HE染色切片为指引，切取HE染色切片癌灶部分对应的石蜡组织条段（1mm-4mm），制备石蜡组织芯，利用组织芯片仪制备乳腺癌穿刺活检组织阵列，石蜡切片制备乳腺癌穿刺活检组织的石蜡组织芯片。所制备的穿刺活检组织芯片可用于相关疾病的免疫组化、原位杂交等分子医学研究。

主权项

一种穿刺活检组织芯片的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：第一步，病理诊断：乳腺穿刺活检组织条经过常规病理固定、脱水包埋、石蜡切片染色后，进行病理诊断。第二步，标本挑选：选择42例乳腺穿刺活检病理诊断确诊为乳腺癌的石蜡组织切片，标记HE染色切片上乳腺癌病灶的区域（>1mm）作为组织芯片制备的目标组织条。第三步，石蜡芯制备：以HE染色切片上乳腺癌病灶的区域的标记为指引，用石蜡切片刀将相应的石蜡组织块中的穿刺组织条切断，切取组织条长度为1mm‑4mm。将石蜡组织块放于70℃预热的金属加热盘上（石蜡块切片面朝下），加热石蜡组织块切片面约1分钟，至石蜡组织块浅表石蜡部分融化，用镊子小心取下乳腺癌病灶目标石蜡组织条。将目标石蜡组织条放于金属加热盘上继续加热至组织条石蜡完全融化。小心将融化的石蜡组织条纵向放入自制的直径为1.5mm的塑料小管中（70℃预热）。将装有目标石蜡组织条的塑料小管整体水平放入少量融化的石蜡中，以便塑料小管内浸满石蜡。将塑料小管取出置于4℃冷台上快速冷却。肉眼对光观察可清晰看见塑料小管内组织条所在的位置，并用记号笔标记组织条两端的位置。用石蜡切片刀在组织条两端标记处切断塑料小管，小心纵向切开塑料小管（注意尽量不要切到组织条），取出石蜡组织条，即为：石蜡芯。第四步，受体蜡模：制备空白石蜡块，利用组织芯片制备仪定位钻取孔径为1.5mm的空心受体蜡模，如附图1。第五步，组织阵列：依照乳腺癌穿刺活检组织的石蜡组织芯片的设计，将总共42例石蜡芯逐一安放到空心受体蜡模中相应的空白孔位点，以阵列表面齐平为基准，如附图2。第六步，阵列融合：将组织阵列置于干燥箱中，调节干燥箱温度与时间，确保所有组织石蜡芯与受体蜡模充分融合且石蜡芯不移位变形。第七步，石蜡切片：利用石蜡切片机切片制作石蜡切片，片厚4um。将石蜡切片平铺与粘附载玻片上，如附图3。在载玻片标记区域作好标记。第八步，乳腺癌穿刺活检组织的石蜡组织芯片芯片制作完毕。结合免疫组化、分子原位杂交等实验分子研究技术，所制备的乳腺癌穿刺活检组织的石蜡组织芯片可用于乳腺癌的分子医学研究。