[发明专利]一种从红腺忍冬叶制备绿原酸的方法

摘要

本发明公开了一种从红腺忍冬叶制备绿原酸的方法，该方法包括以下步骤：药材前处理、乙醇回流提取、浓缩、过滤、凝絮沉淀、树脂吸附分离、浓缩、绿原酸粗品、重结晶、制得绿原酸精品，本发明获得了从中药红腺忍冬叶中分离，纯化绿原酸的最佳工艺条件：用单因素和正交试验对红腺忍冬叶中绿原酸的分离，纯化工艺进行了最佳条件的筛选，采用正交表L9(34)，以乙醇体积、乙醇浓度、pH以及流速为因素，以绿原酸的紫外最大吸收波长320nm为指标进行试验。得到的红腺忍冬叶中大孔树脂分离纯化绿原酸的最佳洗脱工艺条件为：乙醇体积为20ml，乙醇浓度为20％，流速为80滴/min，pH为7，其提取率为1.43％，最佳上柱条件为：1g∶6ml固液比、乙醇pH为2、流速为40滴/min。

主权项

一种从红腺忍冬叶制备绿原酸的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：药材前处理、乙醇回流提取、过滤、浓缩、凝絮沉淀、树脂吸附分离、浓缩、绿原酸粗品、重结晶、制得绿原酸精品，具体步骤为：药材红腺忍冬叶片烘干，再粉碎过60目筛；称取红腺忍冬叶干粉置于园底烧瓶中，再加乙醇混合于磨口圆底烧瓶中加热提取，完成后，趁热抽滤，合并两次提取液，并使用旋转蒸发仪进行浓缩，浓缩至2ml/1g药材；再用醋酸溶液配成壳聚糖胶体作为澄清剂，对浓缩液进行沉淀初步除杂；初步除杂后澄清液再上D101大孔树脂进行纯化，就上柱溶液量、上柱溶液pH值及上柱溶液吸附流速对绿原酸吸附效果的影响进行考察，确定最佳上柱吸附条件，最佳上柱吸附条件为：固液比‑树脂1g∶6ml上柱溶液、乙醇pH为2、流速为40滴/min；经最佳上柱吸附条件吸附后，再就洗脱剂浓度、洗脱剂体积、洗脱剂pH值和洗脱流速对绿原酸洗脱效果的影响进行考察，确定洗脱条件；上述洗脱液乙醇相使用旋转蒸发仪进行浓缩，再在真空干燥箱中真空干燥，干燥物以热水溶解再泠却到室温，溶解液与乙酸乙酯用量比1∶2萃取，水相用乙酸乙酯萃取3‑5次，乙酸乙酯相浓缩干燥得绿原酸粗品；绿原酸粗品再用甲醇溶解，再结晶，得到白色针状晶体，真空干燥；再进行薄层分析，以乙酸乙酯∶甲酸∶水＝10∶1∶2为展开剂展开，以三氯化铁乙醇溶液为显色剂，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色斑点，阴性对照无此斑点。