[发明专利]一种鸡新城疫、传染性支气管炎病毒同胚增殖的培养方法

摘要

本发明公开了一种新城疫、传染性支气管炎两种病毒同胚增殖培养的方法，使鸡新城疫、传染性支气管炎病毒在同胚接种，并且系统性调整了孵化温度、接种日龄、收胚时间和新城疫、传染性支气管炎两种病毒的浓度及比例，达到最优组合，经孵化、冷却、消毒等工序从鸡胚中收取尿囊液抗原。该方法提高了抗原收量，简化了生产步骤，节约了时间和原材料，降低了生产成本，并且操作更为快捷，具有较好的经济效益和社会效益，便于实施和推广应用。

主权项

一种鸡新城疫、传染性支气管炎病毒同胚增殖的培养方法，其特征在于培养方法及步骤如下：（1）将新城疫毒种LaSota株毒种稀释成106EID50，传染性支气管炎毒株M41株用PBS液稀释成103EID50，稀释后将两种病毒液以1:1的比例混合; （2）将混合后毒种接种至11日龄易感鸡胚尿囊内，每胚接种尿囊腔0.15ml，接种后用蜡封接种孔和气孔；（3）将接种后鸡胚放到培养箱，在36.5℃下进行孵化；（4）72小时前每24小时照胚一次，72小时后每6小时照胚一次，弃去72h前的死亡胚，留下72‑96h时间段的死亡胚和96h的活胚，在2‑8℃环境下冷却12h，将冷却的鸡胚取出，放入收胚室，将蛋壳的气室部位用碘酒消毒后，以无菌手术剥去气室部位的蛋壳，将蛋壳膜，用尖头小镊子将绒毛尿囊膜及羊膜撕破，检查胚液是否浑浊或有异物，如果没有则抽取胚液，收集，即得鸡新城疫、传染性支气管炎抗原。