[发明专利]颌下腺特异表达多拷贝人源NGF基因的转基因小鼠构建无效
申请号: | 201210554093.3 | 申请日: | 2012-12-19 |
公开(公告)号: | CN103146706A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 毛富祥;左从林;李洪贞;邓乐;官敏 | 申请(专利权)人: | 昭衍(苏州)新药研究中心有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/89;A01K67/027 |
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地址: | 215000 江苏省苏州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了颌下腺特异表达多拷贝人源NGF基因的转基因小鼠构建,包括如下步骤:(1)将5-6个hNGF基因串联并克隆到小鼠的KLK1B22基因的启动子后面;(2)小鼠的KLK1B22基因的启动子从BAC或基因组上面克隆,并采用ATG上游2kb左右的序列;(3)将小鼠的KLK1B22基因启动子的区域中RE1和RE2之间的片段从载体上切下来,且所述RE1和RE2之间的片段包括KLK1B22基因启动子及5-6个hNGF基因;(4)将切下来hNGF基因片段纯化;(5)将经过纯化的hNGF基因片段注射到小鼠受精卵细胞核内,以生产出具有在小鼠颌下腺内特异表达的多拷贝人源NGF基因的转基因小鼠。 | ||
搜索关键词: | 颌下腺 特异 表达 拷贝 ngf 基因 转基因 小鼠 构建 | ||
【主权项】:
颌下腺特异表达多拷贝人源NGF基因的转基因小鼠构建,其特征是,包括如下步骤: (1)将5‑6个hNGF基因串联并克隆到小鼠的KLK1B22基因的启动子后面; (2)所述小鼠的KLK1B22基因的启动子从BAC或基因组上面克隆,并采用ATG上游2kb左右的序列; (3)将所述小鼠的KLK1B22基因启动子的区域中RE1和RE2之间的片段从载体上切下来,且所述RE1和RE2之间的片段包括KLK1B22基因启动子及5‑6个hNGF基因; (4)将切下来的所述RE1和RE2之间的片段中的hNGF基因片段纯化; (5)将经过纯化的hNGF基因片段通过原核显微注射的方法注射到小鼠受精卵细胞核内,以生产出具有在小鼠颌下腺内特异表达的多拷贝人源NGF基因的转基因小鼠。
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