[发明专利]乙肝e抗原的纯化方法在审
| 申请号： | 201210566412.2 | 申请日： | 2012-12-24 |
| 公开（公告）号： | CN103882042A | 公开（公告）日： | 2014-06-25 |
| 发明（设计）人： | 万晓春;田永帅 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C12N15/51;C07K14/02;C07K1/22 |
| 代理公司： | 深圳市科进知识产权代理事务所(普通合伙) 44316 | 代理人： | 宋鹰武 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种乙肝e抗原的纯化方法，包括以下步骤：将含有5’端或3’端连接了多聚组氨酸编码基因的乙肝e抗原基因的重组质粒转入细菌本体，得到重组细菌；加入诱导剂进行重组细菌培养；将重组细菌裂解，并将裂解液进行离心；将固定化金属螯合亲和层析介质与离心所得上清液或用高浓度变性剂溶解离心所得沉淀制备的沉淀溶解液在允许多聚组氨酸融合乙肝e抗原结合或吸附至所述介质的条件下接触；从所述介质选择性洗脱所述多聚组氨酸融合乙肝e抗原。本发明利用融合标签技术与亲和层析结合，操作简单方便；以多聚组氨酸作为融合标签，对乙肝e抗原的结构无影响。 | ||
| 搜索关键词： | 乙肝 抗原 纯化 方法 | ||
【主权项】：
一种乙肝e抗原的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：将含有重组乙肝e抗原基因的重组质粒转入细菌本体，得到重组细菌，所述重组乙肝e抗原基因包括乙肝e抗原基因和连接于乙肝e抗原基因5’端或3’端的多聚组氨酸编码基因；加入诱导剂进行重组细菌培养；将重组细菌裂解，并将裂解液进行离心，收集离心所得上清液，将离心所得沉淀用高浓度变性剂溶解制备沉淀溶解液；将固定化金属螯合亲和层析介质与上清液或沉淀溶解液在允许多聚组氨酸融合乙肝e抗原结合或吸附至所述介质的条件下接触；从所述介质选择性洗脱所述多聚组氨酸融合乙肝e抗原。
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