[发明专利]HAT半固体筛选培养基以及杂交瘤细胞的筛选方法有效
| 申请号： | 201210572759.8 | 申请日： | 2012-12-25 |
| 公开（公告）号： | CN103898060A | 公开（公告）日： | 2014-07-02 |
| 发明（设计）人： | 万晓春;王彩霞;向军俭 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12N5/20 | 分类号： | C12N5/20;G01N33/569 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 吴平 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种HAT半固体筛选培养基，每100mL所述HAT半固体筛选培养基由如下成分组成：2mL的50×HAT贮存液、20mL的胎牛血清、1mL的100×青霉素和链霉素的双抗溶液、1mL的100×B细胞刺激因子溶液、2mL的50×杂交瘤细胞融合克隆因子溶液、1mL的100×异硫氰酸素标记的抗原溶液以及余量的甲基纤维素半固体培养基。本发明还公开了一种使用HAT半固体筛选培养基的杂交瘤细胞的筛选方法，融合细胞在半固体培养基上呈集落生长，彼此分离，每个克隆由单个细胞形成，避免了不分泌抗体的杂交瘤生长很快而影响分泌抗体的杂交瘤细胞的生长，与传统的有限稀释法相比，筛选效率较高。 | ||
| 搜索关键词： | hat 固体 筛选 培养基 以及 杂交瘤 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种HAT半固体筛选培养基，其特征在于，每100mL所述HAT半固体筛选培养基由如下成分组成：2mL的50×HAT贮存液、20mL的胎牛血清、1mL的100×青霉素和链霉素的双抗溶液、1mL的100×B细胞刺激因子溶液、2mL的50×杂交瘤细胞融合克隆因子溶液、1mL的100×异硫氰酸素标记的抗原溶液以及余量的甲基纤维素半固体培养基；所述甲基纤维素半固体培养基由按照体积比为1：1的2×DMEM培养基和4%的甲基纤维溶液充分混匀得到。
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