[发明专利]cccDNA标准品及其制备方法、定量检测乙肝病毒cccDNA的方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种cccDNA标准品以及制备方法，cccDNA标准品包括一个单位的HBV基因组DNA和一个重组位点attR。本发明还公开了一种使用上述cccDNA标准品的定量检测乙肝病毒cccDNA的方法和试剂盒。这种定量检测乙肝病毒cccDNA的方法以绿豆核酸酶清除rcDNA干扰的同时，制备HBV微环DNA作为cccDNA标准品，以PCR技术结合荧光标记探针杂交法对乙型肝炎病毒cccDNA进行定量检测，相对于传统的实时荧光定量PCR检测cccDNA，定量精确。

主权项

一种cccDNA标准品，其特征在于，所述cccDNA标准品包括一个单位的HBV基因组DNA和一个重组位点attR；所述cccDNA标准品的制备方法，包括如下步骤：首先将一个单位的HBV基因组DNA连接到含有重组位点attB和attP的微环制备载体上，接着采用微环DNA制备技术，attB和attP重新组合后形成attR，从而制备出HBV微环DNA，该HBV微环DNA即为所述cccDNA标准品。