[发明专利]一种检测石榴枯萎病菌致病蛋白的方法

摘要

一种检测石榴枯萎病菌致病蛋白的方法，属于植物保护领域。方法为：芋头生长至第3片时，选择完全展开的健康叶片接种。在接种芋头叶片的边缘近中间部分，致伤直径2 mm的压伤斑3个，将石榴枯萎病菌液体培养后得到的分泌蛋白在致伤处接种，蛋白的接种浓度为50μg·ml-1，接种体积为5μl。接种后96小时在芋头叶片上形成椭圆形或圆形的病斑，测量向叶尖和叶基方向延伸的最长值作为病斑的长度值，该值是比较不同蛋白致病力大小的依据。其分类标准为：病斑长度为3.5mm至4mm为弱致病性；病斑长度在4.1mm至5mm为中等致病性；病斑长度大于5.1mm为强致病性。该方法解决了石榴枯萎病菌分泌蛋白致病性检测的问题，对于研究石榴枯萎病菌致病相关分泌蛋白的功能具有重要意义。

主权项

一种检测石榴枯萎病菌致病蛋白的方法，其特征在于该方法的具体步骤如下： a.芋头生长至第3片时，选择完全展开的健康叶片进行接种；b. 选择在接种芋头叶片主脉与边缘的近中间部分，用致伤设备分别形成直径2 mm的压伤斑3个，在致伤处接种致病分泌蛋白，该致病分泌蛋白是石榴枯萎病菌在配方为：蔗糖20g/L，酵母提取物5g/L，pH 6.3的蔗糖液体培养基中培养72小时后获得，蛋白的接种浓度为50μg/ml，接种体积为5μl； c.接种后96小时在芋头叶片上形成的病斑为椭圆形或圆形，测量向叶尖和叶基方向延伸的最长值作为病斑的长度值； d.将石榴枯萎病菌致病分泌蛋白致病性大小按病斑长度值划分的标准进行致病性弱、中等和强的分类；其分类标准为：病斑长度为3.5mm至4mm之间为弱致病性；病斑长度在4.1mm至5mm之间为中等致病性；病斑长度大于5.1mm为强致病性。