[发明专利]检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法有效
申请号: | 201210583426.5 | 申请日: | 2012-12-28 |
公开(公告)号: | CN103031383A | 公开(公告)日: | 2013-04-10 |
发明(设计)人: | 王振华;张建坤;徐家文;冯汉利 | 申请(专利权)人: | 中华人民共和国湖北出入境检验检疫局 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/645 |
代理公司: | 武汉华旭知识产权事务所 42214 | 代理人: | 周宗贵;刘荣 |
地址: | 430000 湖北*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明提供了一种基于二重PCR扩增检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法,包括以下步骤:首先取一只无菌离心管,在离心管中依次加入灭菌去离子水、PCR缓冲液、dNTPs混合物、正义引物PHIB1、反义引物PHIB2、正义引物SPT1、反义引物SPT2、目标物DNA以及TaqDNA聚合酶,然后将其混合均匀后离心,将反应液离心至管底;将离心管置于PCR仪上进行扩增,扩增后得到PCR反应产物;将PCR产物用2%-3%琼脂糖凝胶电泳分离,经溴化乙锭溶液染色12-20min后,在紫外透射仪上观察PCR反应结果。本发明提供的方法步骤简单、能够有效果的对两种病菌进行检测。 | ||
搜索关键词: | 检测 柑橘 冬生疫霉褐腐 病原菌 方法 | ||
【主权项】:
一种基于二重PCR扩增检测柑橘冬生疫霉褐腐病原菌和柑橘枝瘤病原菌的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)、取一只无菌离心管,在离心管中依次加入灭菌去离子水、PCR缓冲液、dNTPs混合物、正义引物PHIB1、反义引物PHIB2、正义引物SPT1、反义引物SPT2、目标物DNA以及TaqDNA聚合酶,然后将其混合均匀后离心,将反应液离心至管底;(2)、将离心管置于PCR仪上进行扩增,扩增后得到PCR反应产物;(3)、PCR产物用2%‑3%琼脂糖凝胶电泳分离,经溴化乙锭溶液染色12‑20min后,在紫外透射仪上观察PCR反应结果。
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