[发明专利]一种测定CoQ10抑制紫外光B辐射损伤的方法无效

专利信息
申请号: 201210593009.9 申请日: 2012-12-31
公开(公告)号: CN103207276A 公开(公告)日: 2013-07-17
发明(设计)人: 张文娟;党磊;赵仁滨 申请(专利权)人: 北京天辰空间生物医药研发有限公司
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;C12Q1/68
代理公司: 北京华谊知识产权代理有限公司 11207 代理人: 刘月娥
地址: 100090 北京*** 国省代码: 北京;11
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摘要: 一种测定CoQ10抑制紫外光B辐射损伤的方法,属于紫外线辐射的防护技术领域。测定步骤包括:CoQ10用水、甲醇、乙醇、DMSO溶解;HaCat细胞用完全培养基调整细胞浓度为4-10×104/孔,接种于细胞板中,贴壁后换用1%、2%、3%、5%的低血清培养基,分别以照射后4h-24h不同时间点为观察时间点,HaCat细胞培养4h--24h后,用ELISA试剂盒检测各组细胞内CPDs的含量。优点在于,CoQ10可以作为抗光辐射损伤的成分添加到化妆品中,也可作为美白成分应用于化妆品中或作为药品用于治疗光辐射损伤症状。
搜索关键词: 一种 测定 coq10 抑制 紫外光 辐射损伤 方法
【主权项】:
一种测定CoQ10抑制紫外光B辐射损伤的方法,其特征在于,测定步骤如下:(1)CoQ10用水、甲醇、乙醇、DMSO溶解;(2)HaCat细胞用完全培养基调整细胞浓度为4‑10×104/孔,接种于细胞板中,贴壁后换用1%、2%、3%、5%的低血清培养基,同时加入(1)所述的CoQ10溶液,CoQ10终浓度为1uM、5uM、10uM;并使用浓度为5mJ/cm2或20mJ/cm2的UVB照射,分别以照射后4h-24h不同时间点为观察时间点;(3)HaCat细胞培养4h‑‑24h后,用ELISA试剂盒检测各组细胞内CPDs的含量;CoQ10剂量相关性的检测;(4)所述HaCat细胞UVB辐射6h‑‑24h,提取RNA,QPCR检测细胞因子IL‑1α、IL‑6、IL‑8和TNF‑α基因表达水平;所述HaCat细胞UVB辐射6h‑‑24h,采用Luminex检测试剂盒检测细胞因子IL‑1α、IL‑6、IL‑8和TNF‑α分泌情况;(5)所述HaCat细胞UVB辐射6h后,采用western‑blot方法检测各组NF‑κB表达情况。
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