[发明专利]多重核酸分析

摘要

本发明提供一种多重核酸分析方法。所述方法包括步骤：将探针组与样本中的目标核酸杂交；连接杂交的探针；扩增连接的探针；和检测扩增产物以确定样本中目标核酸是否存在或量。多重性的实现可部分通过在引物中添加可检测基团和插入填充序列以致于可以基于可检测基团和片段大小鉴定扩增产物。本发明还提供检测拷贝数小变化的灵敏方法，该方法通过检测测试样本中核酸上多个目标位点的拷贝数与对照样本比较，接着基于数个目标位点的检测拷贝数确定核酸的拷贝数。此外，本发明提供用于多重核酸分析和用于拷贝数小变化测定的试剂盒。

主权项

一种测定样本中核酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：a、将探针组添加到样本中以形成混合物，各探针组包括：i、第一探针，所述第一探针具有与样本中目标核酸的第一区域至少部分互补的第一部分和形成第一引物结合位点的第二部分；ii、第二探针，所述第二探针具有与样本中目标核酸的第二区域至少部分互补的第一部分和用于形成第二引物结合位点的第二部分，其中，当两个探针均与所述目标核酸杂交时，所述第一探针的5’端基本上毗邻所述第二探针的3’端；b、将所述混合物中的核酸变性；c、将所述探针组与所述目标核酸的互补区域杂交；d、在杂交的探针组上实施连接反应以连接基本上毗邻的所述第一探针的5’端和所述第二探针的3’端，从而形成第三探针；e、用引物组扩增所述第三探针，从而获得扩增产物，各引物组包括：i、第一引物，所述第一引物与所述第一引物结合位点至少部分互补；ii、第二引物，所述第二引物与所述第二引物结合位点至少部分互补；f、通过测得扩增产物中所述第三探针是否存在或量，来测定所述样本中目标核酸是否存在或量。