[发明专利]用于酶介导的信号放大的方法

摘要

本发明涉及用于对靶标相关信号的酶介导放大以使样本中的生物学靶标或化学靶标可视化的方法和化合物，其中靶标被固定化，具体地，本发明涉及用于使包括细胞的样本中的靶标可视化的氧化还原酶介导的信号放大。本发明的方法对于与医疗诊断和疗法相关的生物学标记物的定性和定量评估特别有用。

主权项

一种用于非诊断目的的用于检测样本中的固定化靶标的免疫化学方法，其中所述靶标固有地包括具有氧化还原酶酶促活性的酶或与具有氧化还原酶酶促活性的酶相连，所述方法包括在水溶液中孵育假定包括所述靶标的样本，所述水溶液包括(i)所述具有氧化还原酶酶促活性的酶的第一底物，(ii)所述具有氧化还原酶酶促活性的酶的第二底物，以及(iii)过氧化物化合物，其中所述第一底物是α‑氰基‑4‑羟基肉桂酸(ACHCA)，所述第二底物是包括一种或多种能够作为所述具有氧化还原酶酶促活性的酶的底物的化合物以及可检测标记物的结合物分子，其是式(I)的结合物分子：式(I)：(Y)n‑L‑(Z)m，其中Y是能够作为具有氧化还原酶酶促活性的酶的底物的式(II)的化合物：式(II)：其中R1是‑H、‑O‑X、N(X)2或‑S‑X；R2是‑H、‑O‑X、‑N(X)2或‑S‑X；R3是‑H、‑OH、‑NH2或‑SH；R4是‑H、‑O‑X、‑N(X)2或‑S‑X；R5是‑H、‑O‑X、N(X)2或‑S‑X；R6是‑CON(X)2或CO‑X，其中H是氢；O是氧；S是硫；N是氮；且X是H、烷基或芳基；Z是可检测标记物，L是连接物化合物或化学键，n是1～150的整数，m是1～150的整数，其中α‑氰基‑4‑羟基肉桂酸(ACHCA)的量在0.15mM至50mM的范围内。