[发明专利]用于沙门氏菌检测的序列和它们的用法

摘要

本发明涉及基于核酸序列的存在的检测样品中沙门氏菌的快速方法，具体地，涉及基于PCR的检测方法，以及涉及因此有用的寡核苷酸分子和试剂以及试剂盒。在某些实施例中，所述方法用于检测食品或水样品中的沙门氏菌。本发明还涉及用于实施本发明的方法的分离的多核苷酸、复制组合物和试剂盒。

主权项

用于检测样品中沙门氏菌(Salmonella)的存在的方法，所述样品包含核酸，所述样品是食物和环境样品，所述方法包括：(a)提供反应混合物，所述反应混合物包含：(i)一种引物，其包含能够在高于55℃的Tm下选择性杂交至SEQ ID NO:1的序列的SEQ ID NO:47的核酸序列，和一种探针，其包含能够在高于55℃的Tm下选择性杂交至SEQ ID NO:2的序列的SEQ ID NO:29的核酸序列；和(ii)任选地，至少一种其他的引物和探针，其中所述引物长度为至少11个核苷酸，并且所述探针长度为至少14个核苷酸，并且其中(A)所述引物包含能够在高于55℃的Tm下选择性杂交至SEQ ID NO:1的序列或与其互补的序列的核酸序列，并且所述探针包含能够在高于55℃的Tm下选择性杂交至SEQ ID NO:2的序列或与其互补的序列的核酸序列；或(B)所述引物包含能够在高于55℃的Tm下选择性杂交至SEQ ID NO:3的核酸序列或与其互补的序列的核酸序列，并且所述探针包含能够在高于55℃的Tm下选择性杂交至SEQ ID NO:4的序列或与其互补的序列的核酸序列；其中所述(i)和(ii)的引物和探针各自具有3’末端和5’末端，并且其中所述探针的3’末端直接或间接地附接至所述引物的5’末端，从而形成引物‑探针复合物；并且其中所述引物‑探针复合物还包含5’茎序列和3’茎序列，其中所述5’茎序列的3’末端直接或间接地附接至所述探针的5’末端，其中所述3’茎序列的5’末端直接或间接地附接至所述探针的3’末端，并且其中所述3’茎序列的3’末端直接或间接地附接至所述引物的5’末端；以及(b)使用步骤(a)的反应混合物进行所述样品的所述核酸的PCR扩增；以及(c)检测步骤(b)的扩增。