[发明专利]用于定向核酸扩增和测序的组合物和方法在审
| 申请号： | 201280060825.1 | 申请日： | 2012-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN104080958A | 公开（公告）日： | 2014-10-01 |
| 发明（设计）人： | 克里斯·阿穆尔 | 申请（专利权）人： | 纽亘技术公司 |
| 主分类号： | C40B50/06 | 分类号： | C40B50/06 |
| 代理公司： | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人： | 王思琪;郑霞 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供了用于定向核酸扩增和测序的方法和组合物。本发明进一步提供了用于构建定向cDNA文库的方法和组合物。该方法可包括：a)逆转录RNA样品以产生第一链cDNA；b)由第一链cDNA产生第二链cDNA，其中四种dNTP中的至少一种即dATP、dCTP、dGTP或dTTP在第二链合成过程中被修饰的dNTP替代，并掺入第二链中，从而产生双链cDNA；c)对该双链cDNA进行末端修复；d)将衔接子连接至该双链cDNA，其中仅有一种衔接子具有掺入该衔接子的连接链中的修饰的dNTP；e)进行缺口修复；和f)用合适的裂解剂选择性裂解该第二链和具有修饰的dNTP的该衔接子的连接链。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 定向 核酸 扩增 组合 方法 | ||
【主权项】：
一种用于构建定向cDNA文库的方法，其包括：a.逆转录RNA样品以产生第一链cDNA；b.由所述第一链cDNA产生第二链cDNA，其中四种dNTP中的至少一种即dATP、dCTP、dGTP或dTTP在第二链合成过程中被修饰的dNTP替代并掺入所述第二链中，从而产生双链cDNA；c.对所述双链cDNA进行末端修复；d.将衔接子连接至所述双链cDNA，其中所述衔接子中仅有一种具有掺入所述衔接子的连接链中的修饰的dNTP；e.进行缺口修复；和f.用合适的裂解剂选择性裂解所述第二链和所述具有修饰的dNTP的衔接子，从而产生包含所述第一链cDNA的定向cDNA文库。
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