[发明专利]生产自然杀伤细胞的方法、由该方法生产的自然杀伤细胞以及包含该自然杀伤细胞的用于治疗癌症和感染性疾病的组合物有效
申请号: | 201280070546.3 | 申请日: | 2012-12-18 |
公开(公告)号: | CN104204194B | 公开(公告)日: | 2018-08-03 |
发明(设计)人: | 闵普庆;崔哈娜;林玉宰;许正贤;姜常美;李恩京;郑惠真;黄琉炅 | 申请(专利权)人: | 财团法人牧岩生命工学研究所;GC细胞治疗 |
主分类号: | C12N5/0783 | 分类号: | C12N5/0783;C12N5/02;A61K35/56;A61P35/00 |
代理公司: | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人: | 徐金国 |
地址: | 韩国*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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摘要: | 本发明涉及一种生产自然杀伤细胞(下文中,简称“NK细胞”)的方法、由该方法生产的NK细胞以及包含该NK细胞的用于治疗癌症和感染性疾病的组合物。本发明提供一种生产NK细胞的方法,该NK细胞保持高细胞活性和细胞毒性而对癌症和感染性疾病展现高疗效,并且能够以高效率和高浓度在活体外培养。此外,将一种保持细胞浓度处于恒定水平的培养方法用于生产NK细胞,从而可防止细胞的过度生长,这样可使细胞保持在最佳状态。特别地,即使当细胞被冷冻之后解冻时,细胞的功能也不会受损,并且NK细胞可保持高细胞活性和细胞毒性。因此,能够以液体状态或冷冻状态容易地存储和提供NK细胞,而无需额外的处理过程。 | ||
搜索关键词: | 生产 自然 杀伤 细胞 方法 以及 包含 用于 治疗 癌症 感染 性疾病 组合 | ||
【主权项】:
1.一种生产NK细胞的方法,包括以下步骤:(i)从人外周血分离NK细胞;(ii)在含OKT‑3、细胞因子和作为饲养细胞的灭活的外周血单核细胞的培养基中静止培养NK细胞2‑15天,以造成细胞间接触来刺激NK细胞,其中所述细胞因子为IL‑2;(iii)完成步骤(ii)中的静止培养之后,通过加入IL‑2、OKT‑3和作为饲养细胞的灭活的外周血单核细胞重复刺激细胞,并进行静止培养以刺激,引起细胞间接触;和(iv)完成静止培养之后,向细胞中加入含静止培养或悬浮培养所需的细胞因子的培养基,在保持细胞浓度和细胞因子浓度处于恒定水平的同时,进行静止培养或悬浮培养。
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