[发明专利]一种石蜡细胞芯片接种方法有效
申请号: | 201310002236.4 | 申请日: | 2013-01-04 |
公开(公告)号: | CN103091151A | 公开(公告)日: | 2013-05-08 |
发明(设计)人: | 侯英勇;石园;胡沁;何德明;蒋冬先;宿杰阿克苏;曾海英;谭云山 | 申请(专利权)人: | 复旦大学附属中山医院 |
主分类号: | G01N1/36 | 分类号: | G01N1/36 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹;王婧 |
地址: | 200032 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种石蜡细胞芯片接种方法,其特征在于,具体步骤为:将细胞用福尔马林固定过的肠衣包裹,处理至浸蜡的步骤,得到浸好蜡的细胞标本,加热至融化状态,打开肠衣,将细胞及液态石蜡刮入EP管,混匀后,塑形成所需形状的细胞芯片;将蜡模制备框放在蜡模板上,将蜡倒入蜡模制备框中聚合,取出,撤下蜡模板;将所得的蜡模连同蜡模制备框放置于孵箱中,使蜡模略变软后取出,在蜡模的接种范围内钻孔,将细胞芯片种入蜡模相应的孔中;蜡模放在恒温孵育箱内聚合;将蜡模和蜡模制备框置入冰箱,取出后,侧敲蜡模制备框,将蜡模与蜡模制备框分离,将所得的蜡模切片后,即得石蜡细胞芯片。本发明具有廉价、方便、快速、产量高、塑形多样的优点。 | ||
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【主权项】:
一种石蜡细胞芯片接种方法,其特征在于,具体步骤为:第一步:将细胞用福尔马林固定过的肠衣包裹,随同病理科常规组织处理程序进行处理,至浸蜡的步骤,得到浸好蜡的细胞标本;第二步:将浸好蜡的细胞标本连同肠衣加热至融化状态,打开肠衣,将细胞及液态石蜡刮入EP管,混匀后,塑形成所需形状的细胞芯片,留存;第三步:将蜡加热直至融化状态,将蜡模制备框放在蜡模板上,将蜡倒入蜡模制备框中聚合,待蜡聚合后,放入‑10℃~‑20℃冰箱2~10min,取出,撤下蜡模板;第四步:将所得的蜡模连同蜡模制备框放置于50~70℃孵箱中5~8min,使蜡模略变软后取出,在蜡模的接种范围内钻孔,将第二步所得的细胞芯片种入蜡模相应的孔中;第五步:将第四步中所得的蜡模放在恒温孵育箱内聚合,升温至54~56℃,1~3h后停止加热,自然冷却;第六步:将蜡模和蜡模制备框置入‑10℃~‑20℃冰箱10~20min,取出后,侧敲蜡模制备框,将蜡模与蜡模制备框分离,将所得的蜡模切片后,即得石蜡细胞芯片。
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