[发明专利]黄牛CIDEC基因单核苷酸多态性位点的快速检测方法与应用

摘要

本发明公开了一种检测黄牛CIDEC基因5’调控区多个单核苷酸多态性的方法，以包含CIDEC基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P（P1、P2、P3）为引物，PCR扩增黄牛CIDEC基因；用限制性内切酶HaeIII、AccI、HaeIII分别消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛CIDEC基因第-974位、第-956位、第-501位的单核苷酸多态性，因为完全连锁，第-956位的多态性也代表了第-841,-763,-727和-546位的多态性、第-501位的多态性也代表了第-643位的单核苷酸多态性，这样检测三个位点的多态性就可以得到九个位点的多态信息。本发明提供的检测方法为CIDEC基因的单核苷酸多态性与生长性状关系的建立奠定了基础，以便用于中国黄牛肉用生长性状的标记辅助选择（MAS），快速建立遗传资源优良的黄牛种群。

主权项

一种检测黄牛CIDEC基因单核苷酸多态性的方法，其特征在于，以包含CIDEC基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P1、P2、P3为引物，PCR扩增黄牛CIDEC基因；用限制性内切酶HaeIII、AccI、HaeIII分别消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛CIDEC基因第‑974位、第‑956位、第‑501位的单核苷酸多态性， 所述的引物对P1为： 上游引物：agctgtgctgcccaggatggctgccagcgg 下游引物：gggactttctaccatggtgggttctatatcc； 所述的引物对P2为： 上游引物：ggcactgctggtggaggaactgacttcagg 下游引物：cttattgaatgttaactggtttagatgtat； 所述的引物对P3为： 上游引物：gactctgtccccaaggacagaaactagctgag 下游引物：accaagttggagaccccctcagtacccaggctcggc。