[发明专利]定性和定量测定植物活性多糖高效液相色谱-串联质谱法

摘要

本发明公开了一种定性和定量测定植物活性多糖高效液相色谱-串联质谱法。本发明首先对待检多糖样液、混合多糖溶液以及标准葡萄糖溶液分别进行3-氨基-9-乙基咔唑衍生化处理，得到AEC衍生化的待检多糖、混合多糖溶液以及标准葡萄糖溶液；质谱分析，以AEC衍生化的混合多糖对照为参照，对待检多糖样液进行多糖离子碎片峰的确证，确定还原性多糖的聚合度，对待检多糖中所含还原性聚合多糖的种类进行定性；高效液相色谱分析，用AEC衍生化的标准单糖作为参比，分析制作标准葡萄糖曲线，以此对待检多糖中各类还原性聚合多糖进行间接定量。

主权项

定性和定量测定植物活性多糖高效液相色谱‑串联质谱法，其特征在于包括以下步骤：（1）样品前处理：A．固体样品：将样品与超纯水按10mg：1ml混合，充分摇匀，制成待检样液；B．液体样品：将样品充分混匀后得到待检样液；（2）衍生化：将待检样液、混合多糖溶液以及标准葡萄糖溶液用3‑氨基‑9‑乙基咔唑分别进行衍生化处理；（3）质谱定性：以AEC衍生化的混合多糖溶液为参照，对AEC衍生化的待检样液进行质谱离子碎片峰的确证，确定还原性多糖的聚合度，对待检样液中所含还原性聚合多糖的种类进行定性；（4）HPLC定量：对AEC衍生化的待检样液和AEC衍生化的标准葡萄糖溶液分别进行高效液相色谱分析；用AEC衍生化的标准葡萄糖溶液作为参比，分析制作标准葡萄糖曲线，以此对待检样液中各类还原性聚合多糖进行间接定量。