[发明专利]含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体及其构建方法无效
| 申请号： | 201310005728.9 | 申请日： | 2013-01-08 |
| 公开（公告）号： | CN103911387A | 公开（公告）日： | 2014-07-09 |
| 发明（设计）人： | 万晓春;林婷婷;向军俭;王蒲 | 申请（专利权）人： | 深圳先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/79 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 吴平 |
| 地址： | 518055 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体及其构建方法，构建方法为：将mIgG-Fc序列和pMD18-T载体连接，转化大肠杆菌，筛选得到重组载体mIgG-Fc-pMD18-T；将重组载体mIgG-Fc-pMD18-T和pcDNA3.1+质粒分别用Not I和Xba I进行双酶切，将分离纯化后的酶切产物进行连接，转化大肠杆菌，筛选获得含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体。该载体可以在哺乳动物细胞中表达目的蛋白，并通过小鼠IgG Fc作为标签，用抗小鼠IgG Fc的抗体即可检测，表达的蛋白液可以用ProteinA或Protein G的亲和柱纯化，以用于后续蛋白质活性的鉴定。 | ||
| 搜索关键词： | lgg2a fc 标签 表达 载体 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将mIgG‑Fc序列和pMD18‑T载体连接，转化大肠杆菌，筛选得到重组载体mIgG‑Fc‑pMD 18‑T；(2)将重组载体mIgG‑Fc‑pMD18‑T和pcDNA3.1+质粒分别用Not I和Xba I进行双酶切，将分离纯化后的酶切产物进行连接，转化大肠杆菌，筛选获得含鼠lgG2a Fc标签的真核表达载体。
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