[发明专利]烟草中核黄素的定量检测方法

摘要

本发明涉及卷烟检测技术领域，提供了一种烟草中核黄素的定量检测方法。本发明针对烟草样品中核黄素，建立了灵敏、准确、快速测定烟草中核黄素的液相色谱-电喷雾线性离子阱质谱法（LC-ITMS2方法），成功实现烟草样品中核黄素的含量测定。本发明检测方法线性范围为8～10000ng/mL，相关系数R2均大于0.99，检测限为0.5ng/mL（S/N=3），精密度小于3%。本发明方法避免了共流出问题，灵敏度高、选择性优异、简化了冗长复杂的样品前处理，有效缩短了分析时间，大大提高了分析检测效率。

主权项

一种烟草中核黄素的定量检测方法，其特征在于，是采用液相色谱‑电喷雾线性离子阱多级质谱法，包括以下步骤：S1.样品液准备；称取0.25 g 烟末，加入25 mL 0.1 mol/L 盐酸后在95℃水浴中摇荡1小时，冷却后加入20 mL 2 mol/L醋酸铵，用水定容至50 mL即得待测烟草样品溶液，以待测烟草样品溶液制备不同浓度梯度的进样液； 配制核黄素的甲醇溶液作为储备液；配制核黄素的水溶液作为工作标准溶液，核黄素的浓度为4μg核黄素/mL水；S2.将进样液经0.2 μm滤膜过滤后直接进样，采用液相色谱‑电喷雾线性离子阱质谱法进行分析检测；所述液相色谱的条件为：安捷伦Eclipse XDB‑C18色谱柱，所述色谱柱的规格为150 mm ×2.1 mm、5 μm；流动相为含0.1%甲酸的甲醇溶液与0.05%醋酸的混合液，所述甲醇溶液和醋酸的体积比为70%: 30%；使用安捷伦Zorbax C18保护柱，所述保护柱的规格为12.5 mm × 2.1 mm、5 μm，等梯度淋洗，流速200μL/min，柱温30℃，进样环5μL，全环进样；所述电喷雾线性离子阱质谱的条件为：毛细管温度：350℃；喷雾电压：5 kV；鞘气：31 LTQ单位；辅助气：5 LTQ单位；最大离子注射时间300 ms；分离宽度 2 m/z；SRM模式，其中归一化碰撞能量：22%，激活Q：0.30。