[发明专利]农杆菌介导的侵染月季芽点转基因的方法无效
申请号: | 201310057733.4 | 申请日: | 2013-02-25 |
公开(公告)号: | CN103146748A | 公开(公告)日: | 2013-06-12 |
发明(设计)人: | 季静;王罡;武卫党;张迅强 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人: | 王小静 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种农杆菌介导的侵染月季芽点转基因的方法。首先获得月季芽点转基因所需无菌茎段;将茎段接种至固体培养基使其长出芽点;将芽点从茎段上切下,并将其划伤;制备用于月季芽点转基因的农杆菌侵染液;真空条件下用侵染液侵染受伤的芽点;然后将侵染过根癌农杆菌侵染液的芽点及根癌农杆菌共培养;将共培过的芽点接种在筛选培养基上进行筛选培养;经过筛选后的生根苗移栽至温室中;对月季芽点转基因的月季植株做分子检测。本发明的方法对月季的芽点进行转基因,通过对被转基因的幼芽行筛选转基因植株和分子检测进一步验证PCR阳性植株,方法简单高效,转化率可达4%,对木本植物基因工程和遗传育种具有重大意义。 | ||
搜索关键词: | 杆菌 侵染 月季 转基因 方法 | ||
【主权项】:
一种农杆菌介导的侵染木本植物芽点转基因的方法,其特征在包括如下步骤:获得木本植物芽点转基因所需无菌茎段;将茎段接种至培养基A使其长出芽点;将芽点从茎段上切下,并将其划伤;制备用于木本植物芽点转基因的农杆菌侵染液B;真空条件下用侵染液B侵染受伤的芽点;然后将侵染过根癌农杆菌侵染液B的芽点及根癌农杆菌共培养;将共培过的芽点接种在筛选培养基C上进行筛选培养;经过筛选后的生根苗移栽至温室中;对原位转基因月季植株做分子检测。
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