[发明专利]一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法有效
| 申请号： | 201310070417.0 | 申请日： | 2013-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN103145815A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 王保民;张亮;曹振;郭素琴;谭桂玉;南铁贵;李召虎 | 申请（专利权）人： | 中国农业大学 |
| 主分类号： | C07K14/325 | 分类号： | C07K14/325;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30;C07K1/22 |
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| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法。本发明提供的从抗虫棉种子中纯化Bt Cry1Ac蛋白的方法，包括如下步骤：（1）将抗虫棉种子去壳后进行可溶性总蛋白的提取，得到溶液甲；（2）将所述溶液甲进行60%饱和度的硫酸铵沉淀，离心收集沉淀；（3）溶解步骤（2）得到的沉淀并进行透析，得到溶液乙；（4）将所述溶液乙进行免疫亲和层析，收集与抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体特异结合的蛋白组分，即为Bt毒蛋白；所述抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体为是由杂交瘤Bt2F9 CGMCC No.5162分泌产生的单克隆抗体。本发明具有以下优点：（1）简化了纯化流程，降低了纯化成本；（2）缩短了纯化时间，减少了目的蛋白损失。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 抗虫棉 种子 纯化 bt 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法，包括如下步骤：（1）将抗虫棉种子去壳后进行可溶性总蛋白的提取，得到溶液甲；（2）将所述溶液甲进行60%饱和度的硫酸铵沉淀，离心收集沉淀；（3）溶解步骤（2）得到的沉淀并进行透析，得到溶液乙；（4）将所述溶液乙进行免疫亲和层析，收集与抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体特异结合的蛋白组分，即为Bt毒蛋白；所述抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体为是由杂交瘤Bt2F9CGMCC No.5162分泌产生的单克隆抗体。
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