[发明专利]一种烟草抗旱种质的快速、高通量筛选方法

摘要

本发明公开了一种烟草抗旱种质的快速、高通量筛选方法，其方法是烟草发芽试验过程中，待烟草完全发芽，子叶完全展开后，利用高浓度、高分子量的聚乙二醇渗透液模拟烟草幼苗发根和生长的干旱胁迫条件，研究在高渗溶液下烟草小苗的根生长量和植株萎焉比率，从而快速筛选抗旱的烟草，本发明的意义在于规避了烟草种质间在后期生长过程中，由种质生长特性而造成的差异，提供了一种操作简单，快速，准确性好的烟草高通量抗旱筛选方法，为烟草抗旱机理的研究及抗旱材料的利用奠定了基础，有助于烟草的抗旱分离群体筛选。

主权项

一种烟草抗旱种质的快速、高通量筛选方法，其特征在于按如下步骤进行：（1）烟草种子的消毒处理精选大小一致、无破损的种子，用体积浓度8‑12%H2O2处理10min，再用蒸馏水洗3‑4次后，晾干，待用；（2）烟草种子发芽试验培养皿中以双层滤纸为发芽床，然后放入步骤（1）消毒处理过的种子放入培养皿中，用蒸馏水进行发芽，盖好培养皿后，放入昼温度为28℃、10h，夜温度为25℃、14h的气候培养箱进行培养；（3）定苗、控水连续培养7‑10天后，取出，进行定苗，剔除未发芽种子、弱苗，留长势较好的小苗，倾斜放置培养皿，控水至滤纸吸水至饱和，用移液器吸出多余水份；（4）PEG‑6000处理加入等同滤纸吸收饱和所需蒸馏水量的50%PEG‑6000，至皿中PEG‑6000终浓度为25%，然后盖好培养皿，用石蜡膜封口，放入昼温度为28℃、10h，夜温度为25℃、14h的气候培养箱进行培养；以蒸馏水处理为对照；（5）烟草萎焉比率和根长变化量的测定步骤(3)长势较好的小苗经步骤（4）的气候培养箱培连续培养5天后，取出，记录烟草小苗萎焉植株数，测定小苗的根长，计算小苗萎焉植株数和根长生长变化量。