[发明专利]一种替度鲁肽的纯化方法

摘要

本发明涉及医药工艺领域，公开了一种替度鲁肽的纯化方法。该方法将替度鲁肽粗品用乙腈醋酸混合水溶液溶解，然后加水稀释至乙腈和醋酸的体积百分比之和为10%‑30%，再用RP‑HPLC进行梯度洗脱，分离出纯度在95%以上的替度鲁肽流份备用，分离出纯度在90%‑95%的替度鲁肽流份再次进行洗脱，混合在95%以上的替度鲁肽流份调整乙腈体积百分比低于15%、pH值为6‑7后析晶，离心后所得固体为纯品。本发明用醋酸乙腈混合溶解体系对替度鲁肽粗品前处理，而后以适宜的流动相进行RP‑HPLC梯度洗脱，最后通过盐析和脱盐纯化出品质较高的替度鲁肽纯品，与现有RP‑HPLC纯化方法相比，提高了纯化效率和收率。

主权项

一种替度鲁肽的纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将替度鲁肽粗品用乙腈‑醋酸混合水溶液溶解，然后加水稀释至乙腈和醋酸的体积百分比之和为10％‑30％，得到替度鲁肽粗品溶液；步骤2、将替度鲁肽粗品溶液用RP‑HPLC进行梯度洗脱20‑40min，从替度鲁肽主峰出现开始至替度鲁肽主峰结束分10‑20次收集替度鲁肽流份，分离出替度鲁肽纯度在95％以上的替度鲁肽流份备用，分离出纯度在90％‑95％的替度鲁肽流份进行下步纯化；其中，所述梯度洗脱以pH值为5.5‑6.5的硫酸‑高氯酸混合水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，乙腈浓度以体积百分比计从25％升至45％，采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；步骤3、将步骤2收集的替度鲁肽纯度在90％‑95％的流份再次按照步骤2的方法进行RP‑HPLC梯度洗脱，分离出替度鲁肽纯度在95％以上的替度鲁肽流份备用；步骤4、混合步骤2和步骤3分离的替度鲁肽纯度在95％以上的替度鲁肽流份，调整替度鲁肽流份中乙腈体积百分比低于15％、pH值为6‑7后静置析晶，离心后所得固体即为替度鲁肽纯品。