[发明专利]一种高效疏水介质的制备方法及其在纯化蛇毒降纤酶中的应用

摘要

一种高效疏水介质的制备方法及其在纯化蛇毒降纤酶中的应用。其制备方法包括如下步骤：1）利用分散聚合法制备聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA)微球；2）以聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA)微球为基质制备高效疏水介质；高效疏水介质以20MPa压力装填于不锈钢色谱柱中，然后将柱子连接液相色谱系统，用来纯化蛇毒降纤酶。本发明的优点在于产品纯度高、收率高、操作简便、达到产业化要求，利于推广。

主权项

一种高效疏水介质的制备方法，其特征在于方法步骤为：1）利用分散聚合法制备聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球：各原料组分为：甲基丙烯酸环氧丙酯50‑100 g、偶氮二异丁腈或过氧化苯甲酰1‑2 g、聚乙烯吡咯烷酮5‑20 g、乙醇600‑800 ml、甲苯70‑200 ml；制备过程如下：将称量好的原料加入到适当的玻璃反应瓶中,使其充分溶解并通氮气除氧，然后置反应瓶于带有旋转和加热装置的设备上,于65‑75摄氏度下聚合24‑36h，反应结束后,用沉降方法除去溶剂,并用乙醇充分洗涤,即可得到颗粒分布基本呈现单分散的聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球；2）以聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球为基质，通过化学反应接入疏水配基制备高效疏水介质：在催化剂三氟化硼乙醚的作用下，聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球与醇、酚反应，得到高效疏水介质，催化剂的加入量为0.01‑0.03ml/g﹒PGMA，反应时间为30‑50min，反应温度控制在45‑50℃。