[发明专利]一种山药苗离体繁殖方法

摘要

本发明公开了一种山药苗离体繁殖方法，其步骤：A、取山药幼嫩带腋芽茎段为外植体，酒精、升汞表面消毒后无菌水冲洗；B、用灭菌的手术刀将茎段在无菌纸上切成带节茎段，按极性方向竖插于诱导培养基中；C、光照恒温培养，长出丛芽；D、将丛芽切割成数个小丛芽，转入诱导培养基中进行继代增殖培养；E、继代培养过程中的健壮小苗转生根培养基中，待长出根时开瓶炼苗，清洗后移栽到基质中，保温保湿，组培苗成活后移栽。获得的山药苗遗传稳定性好，繁殖占用空间小，繁殖速度快，一年一个芽可繁殖十万棵以上山药苗。有效解决山药种植中的优质山药种苗供应问题。所建立的生产体系稳定、周期较短，能满足规模化快繁生产。

主权项

一种山药苗离体繁殖方法，其步骤是：A、取利川山药刚长出的10~15 cm地上茎为外植体，剪成2~4 cm带茎节的节段，先用洗衣粉水摇晃浸泡4~6 min，再用自来水冲洗，在超净工作台上用75 %体积比的酒精溶液浸泡10~30 s，无菌水冲洗，再用0.1%重量比升汞溶液消毒3~7 min，无菌水冲3~5次；B、无菌纸吸干外植体表面水分，用灭菌的手术刀将茎切成0.9~1.1cm的带节茎段，按极性方向竖插于配制好的培养基中，诱导培养基的有效成份为：MS+KT 1.5~2.5 mg/L+NAA 0.1~0.2 mg/L+琼脂4000~ 6000 mg/L+白糖 20000~30000 mg/L+PVP 100~200 mg/L；C、光照培养，温度为25~28 ℃，光强1500~3000 Lx，每天光照10~16 h，培养30~60 d，长出丛芽；D、将丛芽切割成数个小丛芽转入B步骤中的诱导培养基中进行芽的继代增殖培养，以后每隔25~35 d 继代1 次，继代培养过程中将已有3~4 片展开叶，苗高4~5 cm 的小苗转生根培养基中，生根培养基的有效成份为：1/2MS+BA 0.1~0.3 mg/L+NAA 0.4~0.6 mg/L+琼脂4000~6000 mg/L+白糖 30000~60000 mg/L+活性炭0.1 %~0.3 %；E、山药试管苗接种于生根培养基中30~40 d，待叶片4~5片， 长2条以上根时开瓶炼苗5~7 d，将瓶内苗取出，用0.003 %~0.005 % 重量比NAA溶液浸苗根基部10~15 min，将组培苗移栽到基质∶草炭∶珍珠岩∶蛭石=2∶1∶1中，浇足定根水，盖上小拱棚膜保温保湿，前期温度保持在15~25 ℃，湿度80~90 %，7~15 d后揭膜降低温度，增加光照强度，每隔2~3周浇施 0.1 %~0.3 %重量比尿素和0.1 %~0.3 %重量比KH2PO4或稀薄粪水，注意进行病虫害防治，组培苗成活率达95 %，将成活苗移栽。