[发明专利]一种产朊假丝酵母蛋白制剂及其在养殖中的应用

摘要

本发明涉及一种产朊假丝酵母蛋白饲料的固体发酵制备方法及其在养殖中的应用，采用产朊假丝酵母菌作为发酵菌种，经斜面培养和种子培养后，接种于经优化的固体培养基中，25~28℃培养，经过三级放大而进行大规模发酵生产。生产工艺简单稳定，菌体密度高，蛋白质含量高，发酵产物无需分离纯化，易于推广使用。将产朊假丝酵母培养物添加到猪饲料中，均能达到较好的实验效果，能够预防消化道疾病、促进生长、增加体重、降低料肉比，可以作为畜禽饲料添加剂应用于养殖业中。

主权项

一种产朊假丝酵母蛋白制剂的制备方法包括以下步骤：   （1） 菌种活化：    本发明采用产朊假丝酵母（Candida utilis）作为发酵菌种，将‑80℃保存的产朊假丝酵母菌种在 YPD固体（蛋白胨 10g，酵母提取物 5g，葡萄糖10g，琼脂粉15g，加水至1升，高温高压灭菌备用）斜面上划线，28℃培养16~24小时；   （2）制备一级种子：    将活化的产朊假丝酵母菌种，用接种环挑取一环接种于200 mL YPD液体培养基（蛋白胨 10g，酵母提取物 5g，葡萄糖10g，加水至1升，高温高压灭菌备用）中，将三角瓶置于摇床中，28℃，250rpm，振荡培养16~24小时后，制得一级种子液；   （3）配制固体发酵培养基：固体干基：以玉米粉和小麦粉为基础料（质量比为3:1），葡萄糖2%，K2HPO4 1.0%，生物素0.01%；将固体干基加入质量比为1:1~2的无菌水，调pH值至5.5，搅拌均匀；将固体培养基经121℃、20min高温高压灭菌，待冷却后即可作为固体发酵培养基使用；     （4）固体发酵：将经过灭菌处理的固体发酵培养基按照8~10%的接种量接入一级种子菌，搅拌均匀，保持湿度为50~70%，温度为25~28℃，培养16个小时左右，制得二级种子；将二级种子按照8~10%的接种量加入灭菌固体发酵培养基中进行扩大培养，搅拌均匀，保持湿度为50~70%，温度为25~28℃，培养16个小时左右，制得三级种子；可以根据具体的培养用量，进一步将三级种子按照8~10%的接种量进一步扩大培养。