[发明专利]一种提取苹果属植物树皮组织全蛋白的方法有效
| 申请号： | 201310088899.2 | 申请日： | 2013-03-19 |
| 公开（公告）号： | CN103265613A | 公开（公告）日： | 2013-08-28 |
| 发明（设计）人： | 张彩霞;丛佩华;张利义;康国栋;田义;王强;杨玲 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院果树研究所 |
| 主分类号： | C07K1/30 | 分类号： | C07K1/30 |
| 代理公司： | 沈阳晨创科技专利代理有限责任公司 21001 | 代理人： | 任玉龙 |
| 地址： | 125100 辽宁*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | 一种提取苹果属植物树皮组织全蛋白的方法，具体为：选择待采集样品的枝条，无菌水清洗表面后快速风干，然后将树皮分割为若干小块；准确称取2g树皮样品，置于研钵中，研磨至精细粉末状，将粉末样品盛装于离心管；样品悬浮于4毫升pH8.0的饱和酚和4毫升样品提取液中，4℃下涡旋振荡30分钟；离心15分钟，收集上层酚相；将收集的酚相中加入5倍体积甲醇醋酸铵溶液，沉淀后的溶液离心10分钟，沉淀物经冷丙酮漂洗三次，室温下风干，得到蛋白干粉，-80℃条件下保存备用。本发明的优点：适于苹果属植物枝条表皮蛋白质提取，可提高样品的得率，有效去除多酚和色素等杂质。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 提取 苹果 植物 树皮 组织 蛋白 方法 | ||
【主权项】：
一种提取苹果属植物树皮组织全蛋白的方法，其特征在于：所述的提取苹果属植物树皮组织全蛋白的方法，具体为：选择待采集样品的枝条，无菌水清洗表面后快速风干，用锋利的小刀刮下采集部位的树皮周皮，然后将树皮分割为若干小块，面积为0.5‑1.5cm2；准确称取2g树皮样品，置于研钵中，加入0.5克石英砂，0.2克聚乙烯聚吡咯烷酮，然后加液氮研磨树皮样品10‑20分钟，至精细粉末状，粒径为0.08‑0.12毫米，将粉末样品盛装于离心管；样品悬浮于4毫升pH8.0的饱和酚和4毫升的样品提取液中，4℃下涡旋振荡30分钟；匀浆液在4℃下，15000×g，离心15分钟，收集上层酚相；将收集的酚相中加入5倍体积0.1M甲醇醋酸铵溶液，‑20℃下沉淀5h以上；沉淀后的溶液在4℃下，15000×g，离心10分钟，沉淀物经含20mM二硫苏糖醇的冷丙酮，漂洗三次，室温下风干，得到蛋白干粉，‑80℃条件下保存备用。
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