[发明专利]大熊猫孕酮浓度值的快速检测方法

摘要

本发明公开了一种大熊猫孕酮浓度值的快速检测方法，在尿样检测结果没有差异的前提下，通过将样品由传统室温下孵育2小时改变为37℃孵育0.5小时，使得大熊猫孕酮浓度值的全部检测过程由原来的3小时缩短到1.5小时，检测时间缩短了50%，为适时自然交配和人工授精争取了宝贵的时间。

主权项

一种大熊猫孕酮浓度值的快速检测方法，包括以下步骤：（1）对雌性大熊猫进行尿样收集，在尿样上标记后进行冷冻或冷藏保存；（2）用孕激素抗体CL425将96孔酶标板包被6～48小时；（3）将孕酮标准品和尿样稀释后，分别按顺序依次加入到已经包被好的96孔酶标板孔中；在96孔酶标板孔中加入Horseradish peroxidase溶液，在37℃下孵育0.5小时后，用洗液洗涤96孔酶标板；（4）将H2O2和ABTS加入到柠檬酸底液中，混合均匀成显色溶液；（5）往洗涤后的96孔酶标板孔中加入已配制好的显色溶液,室温下孵育30～60分钟后用酶标仪读取光吸收值，所得数值为该大熊猫孕酮值；（6）将尿样和肌酐标准品稀稀释后分别按顺序依次加入到96孔酶标板中，再在96孔酶标板孔中加入NaOH和苦味酸，在室温下孵育10～20分钟后，用酶标仪检测光密度值，所得数值为该大熊猫尿样肌酐值；（7）用测到的该大熊猫孕酮值除以该大熊猫肌酐值，所得结果为该大熊猫孕酮浓度值。