[发明专利]一种基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法

摘要

本发明提供了一种基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法，属于分析化学领域。在抗坏血酸钠还原二价铜为一价铜作为催化剂的条件下，使修饰有叠氮基与修饰有炔基的DNA发生1,3-偶极环加成反应，从而将修饰有蔗糖转化酶的DNA固定在磁珠上。通过分离磁珠与溶液，并将清洗后的磁珠溶于蔗糖溶液中进行酶解反应，再使用血糖仪测量酶解后的反应溶液，即可检测铜离子的浓度。该方法以血糖仪为平台，能够便携的、快速、现场检测铜离子浓度。可将该方法应用于人体血清样品中铜离子浓度的检测，本发明具有操作简单、成本低、灵敏度高、特异性好等优点。

主权项

一种基于点击化学的便携式检测铜离子浓度的方法，其特征在于：按照以下步骤进行：（1）制备浓度为0.3μM的修饰有炔基和蔗糖转化酶的DNA化合物；（2）将修饰有链霉亲和素的磁珠溶于由0.1M NaCl、0.1M pH=7.3的PBS、0.05% Tween‑20组成的缓冲溶液中，加入0.3μM修饰有生物素的DNA，室温振荡30±1分钟，制备修饰在磁珠上的DNA化合物；（3）将步骤（1）与（2）制备的修饰有炔基和蔗糖转化酶的DNA化合物与修饰在磁珠上的DNA化合物以摩尔比1:1混合，加入待测样品和抗坏血酸钠，室温培育1.5±0.5小时；（4）用磁铁分离步骤（3）中的磁珠与混合溶液，用缓冲溶液洗涤磁珠三次，洗涤后的磁珠中加入10μL缓冲溶液，再加入20μL 1M蔗糖溶液，于40℃反应15分钟；（5）用血糖仪配合血糖仪试纸测定步骤（4）反应后的溶液，记录数据；（6） 以已知铜离子浓度为横坐标，其对应的血糖仪读数为纵坐标，绘制曲线，得到铜离子浓度和血糖仪读数的线性方程，然后根据待测样品的血糖仪读数，计算对应的铜离子浓度。