[发明专利]树鼩IL-6构建的质粒为标准品的TAQMAN探针实时荧光定量PCR方法有效
| 申请号： | 201310104841.2 | 申请日： | 2013-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN103146838A | 公开（公告）日： | 2013-06-12 |
| 发明（设计）人： | 代解杰;黄晓燕;孙晓梅;罕园园;陆彩霞;匡德宣;王文广;仝品芬;徐娟;殷安国;李晓飞 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院医学生物学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 昆明正原专利商标代理有限公司 53100 | 代理人： | 陈左 |
| 地址： | 650118 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 一种以树鼩IL-6质粒为标准品的TAQMAN探针荧光定量PCR方法，包括对树鼩IL-6基因片段的克隆并测序，以克隆的树鼩IL-6基因为目标，设计TAQMANPCR引物和探针，设计实验找到最优条件下引物的退火温度、引物浓度、探针浓度，提纯树鼩IL-6质粒计算IL-6基因片段拷贝数，以计算好的树鼩IL-6质粒用10倍梯度稀释，配制拷贝数为105～108copies阳性质粒建立标准曲线，并检测其灵敏性。 | ||
| 搜索关键词： | 树鼩 il 构建 质粒 标准 taqman 探针 实时 荧光 定量 pcr 方法 | ||
【主权项】：
一种树鼩IL‑6构建的质粒为标准品的TAQMAN探针实时荧光定量PCR方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）对树鼩IL‑6基因片段的克隆并测序，（2）以克隆的树鼩IL‑6基因片段为目标，设计TAQMAN PCR引物和探针，（3）设计实验得到引物的退火温度、引物浓度和探针浓度，并提纯树鼩IL‑6质粒计算IL‑6基因片段拷贝数，（4）以计算好的树鼩IL‑6质粒用10倍梯度稀释，配制拷贝数为105 ～108copies 阳性质粒建立标准曲线，（5）验证本方法的重复性、稳定性和灵敏性。
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