[发明专利]一种快中子辐照结合组织培养的花生育种方法

摘要

本发明提供了一种快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，主要步骤是将花生种子经快中子辐照处理后，进行表面杀菌；分离胚小叶，接种到体胚诱导培养基中培养；将形成体胚的外植体转移到体胚萌发培养基中培养；体胚萌发后转移到成苗培养基中培养，促使其长成小苗；获得的再生苗经嫁接移栽田间，常规田间管理。本发明获得的再生植株后代（M2）发生明显变异和分离。本发明经快中子辐照处理的种子经组织培养可获得大量再生植株，1粒种子可获得十几个甚至几十个再生植株，因此大大增加了选择几率，克服花生种子较大，达不到诱变育种选择群体的困难。并且本发明突变体的再生通过胚胎发生途径，体细胞胚起源于单个细胞，可避免突变体的嵌合性。

主权项

一种快中子辐照结合组织培养的花生育种方法，其特征在于它包括如下步骤：(1) 挑选饱满成熟的花生种子进行快中子辐照处理，辐照的剂量为9.7Gy~18.0Gy；(2) 将辐照处理后的种子去子叶，取种胚进行表面消毒; (3) 在无菌条件下分离所述种胚的胚小叶为外植体，接种到添加12～15mg/L 2,4‑D的体胚诱导培养基上进行培养，诱导体胚形成； (4) 将形成体胚的外植体转移至添加4~8mg/L TDZ的 体胚萌发培养基上培养，诱导体胚萌发； (5) 将萌发的体胚转移到MS培养基上培养，促使萌发的体胚长成再生苗；(6) 当再生苗生长至1.5～2.5cm时，从基部切下，嫁接于无菌萌发的花生实生苗的下胚轴上，经无菌培养后移栽于育苗基质中驯化培养，后移栽到田间。