[发明专利]一组用于人类亲子鉴定的多重PCR引物组合及检测方法

摘要

本发明涉及一组可用于人类亲子鉴定的多重PCR引物组合，通过该引物组合可以对80个SNP遗传标记进行检测。这些引物组合中上游引物的核苷酸序列依次如SEQ ID NO.1～80所示；下游引物的核苷酸序列依次如SEQ ID NO.81～160所示；单碱基延伸引物的核苷酸序列依次如SEQ ID NO.161～240所示。本发明涉及的上述多重PCR引物组合，优选利用飞行时间质谱方法来进行人类的亲子鉴定，结果准确，方法快速简便并且有很高通量，具有良好的应用前景。

主权项

一组用于人类亲子鉴定的多重PCR引物组合，其特征在于，所述引物组为：SEQ ID NO.1～80所示的上游引物；SEQ ID NO.81～160所示的下游引物；SEQ ID NO.161～240所示的单碱基延伸引物。序列编号上游引物(5’→3’)SEQ ID NO.1ACGTTGGATGAAGGGCAGGTGGGATACCAASEQ ID NO.2ACGTTGGATGGGAGATGTCACTTGGCATAGSEQ ID NO.3ACGTTGGATGTGTTCTTCAAATGCCAAGGGSEQ IDNO.4ACGTTGGATGGTAGGATGGATCAGGGACACSEQ ID NO.5ACGTTGGATGCACTCTCTGCCTTATATTGGSEQ ID NO.6ACGTTGGATGTACATGGGTGTCCCTAATCCSEQ ID NO.7ACGTTGGATGTCTGTATCTATGGCCATGTGSEQ ID NO.8ACGTTGGATGGCTTGAATATCTGCCATTCCSEQ ID NO.9ACGTTGGATGAAAGGGCTGACAGGTAGCACSEQ ID NO.10ACGTTGGATGAAGTGGTCAGAAGTGCTCTCSEQ ID NO.11ACGTTGGATGTCCTGTGAGAGGTTTGCATCSEQ ID NO.12ACGTTGGATGATTGTATAGGGAGAGAGGTCSEQ ID NO.13ACGTTGGATGCCTTTAAGATTCGGCTTAGGSEQ ID NO.14ACGTTGGATGGTTGAGCACAAAGGTGACAGSEQ ID NO.15ACGTTGGATGCTCTGCAGAATGAAAGTGASEQ ID NO.16ACGTTGGATGTGTTCCACTCTTGTAACTCCSEQ ID NO.17ACGTTGGATGCCATCAGCATGTGGTTGACSEQ ID NO.18ACGTTGGATGTGTTAATCAAACAAGATGGSEQ ID NO.19ACGTTGGATGGAAGCAACACACACATGCACSEQ ID NO.20ACGTTGGATGCAAGAATCAGTATTTTGAGSEQ ID NO.21ACGTTGGATGCCTGGGTAATTCTACCTTGCSEQ ID NO.22ACGTTGGATGACATATGGGGCTGTCATCTCSEQ ID NO.23ACGTTGGATGTCTCCAAGAAGGAAAGTCTCSEQ ID NO.24ACGTTGGATGCTGAACAAAGAATTAAGGTCCSEQ ID NO.25ACGTTGGATGAAGGGCACCAGTGGAATTTGSEQ ID NO.26ACGTTGGATGAGATACAGCAGCTACAGAGGSEQ ID NO.27ACGTTGGATGCCTGAATTCCCTAGCTTCTGSEQ ID NO.28ACGTTGGATGGCATTCTGGAACTGCATGCCSEQ ID NO.29ACGTTGGATGCTGCCACTGCTGGTCTGAGSEQ ID NO.30ACGTTGGATGCAAGAAAGGAGGGCACATTCSEQ ID NO.31ACGTTGGATGTGAGCATTTACCACAATGCCSEQ ID NO.32ACGTTGGATGTTACACAATCCCATTGCCTGSEQ ID NO.33ACGTTGGATGATCTCGAGGGTCTTCTAGGTSEQ ID NO.34ACGTTGGATGAAGCACAAAAAGTGTAGGCSEQ ID NO.35ACGTTGGATGCCTAAGGATTACCTCTCCAASEQ ID NO.36ACGTTGGATGTGCCCTAAGGTTATGACCATSEQ ID NO.37ACGTTGGATGACACCAGACAAGCTGCATTCSEQ ID NO.38ACGTTGGATGAAGAAAATCTGGCAAGGGCGSEQ ID NO.39ACGTTGGATGCATCCATGTAGGAACCAGAGSEQ ID NO.40ACGTTGGATGCCTACCACAACGTGTAGTGASEQ ID NO.41ACGTTGGATGTTCACCACCCAATCTCTCTCSEQ ID NO.42ACGTTGGATGCACAAATCTAAACAGCAGCASEQ ID NO.43ACGTTGGATGGTTGACATTTTTATGTACTCSEQ ID NO.44ACGTTGGATGTAAGACCCCACTACTCATCSEQ ID NO.45ACGTTGGATGTTGCTTCACACATACAACTCSEQ ID NO.46ACGTTGGATGCTTTCCTTTCTTTCACTGGSEQ ID NO.47ACGTTGGATGGAATGTTCTCAACCTGCCACSEQ ID NO.48ACGTTGGATGTGGTAGGAAGCTACCAACTCSEQ ID NO.49ACGTTGGATGTCATATATATTGCTGTTCCSEQ ID NO.50ACGTTGGATGTTGGTACTGATCAAGTACTGSEQ ID NO.51ACGTTGGATGGAACAGATAGTTGGCCACACSEQ ID NO.52ACGTTGGATGACAGTTTGTGGCAGATCATCSEQ ID NO.53ACGTTGGATGTTGGTTCATGGGTGGGCCAGSEQ ID NO.54ACGTTGGATGACAGGAGGTCCTAGCACCAASEQ ID NO.55ACGTTGGATGATCTCTCGCCCTGACTTATCSEQ ID NO.56ACGTTGGATGAAATTCAGACCATCTCAGGGSEQ ID NO.57ACGTTGGATGTCTCTTTGATAGAGGAGAGGSEQ ID NO.58ACGTTGGATGTTAAACCACAACGCTGGCACSEQ ID NO.59ACGTTGGATGTGAAAAAGAGAGAGCAGTGGSEQ ID NO.60ACGTTGGATGCTTTATGGAACGTGCCACTGSEQ ID NO.61ACGTTGGATGCCTTGCCCAGACCCTCTAATSEQ ID NO.62ACGTTGGATGGTTGAAGACAACCTCCAGGCSEQ ID NO.63ACGTTGGATGTCCCTTAGGATCCATCAAGCSEQ ID NO.64ACGTTGGATGGTATCTTATGTTCGTTTTCGSEQ ID NO.65ACGTTGGATGAACGAGACCCTGGGCATGACSEQ ID NO.66ACGTTGGATGAGGTTTTCCTTCAGCACCTCSEQ ID NO.67ACGTTGGATGTCGCCTAAACTAGAAACCTGSEQ ID NO.68ACGTTGGATGAGGCTGGTTGACACCTTTAASEQ ID NO.69ACGTTGGATGCCACTTAGTTTTGGATTCAGSEQ ID NO.70ACGTTGGATGTGCTAACATGATGCCCACTCSEQ ID NO.71ACGTTGGATGCTCTTGGATAATGGAATTGAGSEQ ID NO.72ACGTTGGATGCCAGGTAGTTGGAACAGTCASEQ ID NO.73ACGTTGGATGGTGCACACATGTATTTCTACSEQ ID NO.74ACGTTGGATGTTCTCATGACTAATAGCTGSEQ ID NO.75ACGTTGGATGAGCATCCAAAGCCTTGAGACSEQ ID NO.76ACGTTGGATGTGACCTACTACCCAAAGCTGSEQ ID NO.77ACGTTGGATGTCTAAGATAGTTTGTCCCACSEQ ID NO.78ACGTTGGATGGACTTCTAGAATAATAGAGCSEQ IDNO.79ACGTTGGATGTAGTATGAGCCTCTACCTACSEQ ID NO.80ACGTTGGATGGGGTCACAGGGAGATTCTAA序列编号下游引物(5’→3’)SEQ ID NO.81ACGTTGGATGACAGATTACGCTCCCCAGTGSEQ ID NO.82ACGTTGGATGCCAACAGTCAATGGTACAGGSEQ ID NO.83ACGTTGGATGAAGCTAGACAATGCCTAGACSEQ ID NO.84ACGTTGGATGTAGCTGCGTCATGCATTCTGSEQ ID NO.85ACGTTGGATGTTGCCCTTTGGGTGTTCATCSEQ ID NO.86ACGTTGGATGCTGATGGAACTTGAGAAATGGSEQ ID NO.87ACGTTGGATGCAGAGAGCTTTTGGAGCCTASEQ ID NO.88ACGTTGGATGAGAGAAATGCAGGTTTTCCGSEQ ID NO.89ACGTTGGATGCTGATGAGCTTTGCTGGAGASEQ ID NO.90ACGTTGGATGGTAAGATCTATGAGGAAAACSEQ ID NO.91ACGTTGGATGTTCAGAGCTCTCAGGGTTTGSEQ IDNO.92ACGTTGGATGGTTGAGTTTTTCCAACTTATCSEQ ID NO.93ACGTTGGATGCAGGAAGGAGATCACACTACSEQ ID NO.94ACGTTGGATGCAGGGTCAGATGTGATCTTCSEQ ID NO.95ACGTTGGATGGGGTACTTTTTCTCTGAAGGSEQ ID NO.96ACGTTGGATGTCCCAAGTACCATGCTGAACSEQ ID NO.97ACGTTGGATGAGTCCAGTATTCTATTGCCCSEQ ID NO.98ACGTTGGATGGAACAACAAAGTCAACTAGCSEQ ID NO.99ACGTTGGATGTGAAGTTTGTCTACATTGGSEQ ID NO.100ACGTTGGATGCTACTCACCCATCTCCAAAGSEQ ID NO.101ACGTTGGATGACTACCTAAACGTGCTTTGGSEQ ID NO.102ACGTTGGATGCAGCTTCAGGCAGGTCTTTGSEQ ID NO.103ACGTTGGATGGAAGTTCTTGCAGGTGACAGSEQ ID NO.104ACGTTGGATGCTAGGCACCCAAGGCTTGAASEQ ID NO.105ACGTTGGATGTCCGGCTGAGGAAACTAACASEQ ID NO.106ACGTTGGATGTGGTGTCCTTGTAGGAAGGGSEQ ID NO.107ACGTTGGATGTGGCCATGGGTGTTATTCAGSEQ ID NO.108ACGTTGGATGCTAGAAAATGTCATCCTCCCSEQ ID NO.109ACGTTGGATGTCCTTGTCTCCTGTGTGAACSEQ ID NO.110ACGTTGGATGGCAGAGGTAAACTGCTTTGGSEQ ID NO.111ACGTTGGATGGACTTCTGACCAAGGTTAATGSEQ ID NO.112ACGTTGGATGATCGTATGATACTTTAGGGCSEQ ID NO.113ACGTTGGATGACAACAAGGGAATTCCCTGCSEQ ID NO.114ACGTTGGATGATCAGGTTCATGACTTCTGCSEQ ID NO.115ACGTTGGATGCTTTTCGGCAATGGAGAAGGSEQ ID NO.116ACGTTGGATGTCAACAGGGATCATTAAGCCSEQ ID NO.117ACGTTGGATGGATGTTCATAGCCTTCCCTCSEQ ID NO.118ACGTTGGATGTTTACACCCCCTCCTGTATCSEQ ID NO.119ACGTTGGATGAAGAGCTATCCCCGGAGAAGSEQ ID NO.120ACGTTGGATGGCCAGGAAAATAAACTAAGACSEQ ID NO.121ACGTTGGATGGATTTTTGCAGTGACATCCCSEQ ID NO.122ACGTTGGATGTGGAGAATTTCTGGAGATGCSEQ ID NO.123ACGTTGGATGGAAGTGGGATAGGATCACTGSEQ ID NO.124ACGTTGGATGCTTCCAGTATCTCCAAATACCSEQ ID NO.125ACGTTGGATGAGAGATCGATCTACAACTGSEQ ID NO.126ACGTTGGATGCCCTAGCATTGTATACAGCCSEQ ID NO.127ACGTTGGATGAGAGCTGGGCTGGTTAAAAGSEQ ID NO.128ACGTTGGATGGCAGTGACTAGTCTGTCTACSEQ ID NO.129ACGTTGGATGCAAATGGTGTTATAGGCATAGSEQ ID NO.130ACGTTGGATGCCACACATAGGCCACTCTTCSEQ ID NO.131ACGTTGGATGGTGAGATGAGCTTGCAGGAGSEQ ID NO.132ACGTTGGATGAAAATCTGCCGAAAAATAASEQ ID NO.133ACGTTGGATGGCCTGTGGATGAGGCTATAASEQ ID NO.134ACGTTGGATGTGTCAAAACTTATCAAAATGSEQ ID NO.135ACGTTGGATGTGGGTGGAAGAGGAAGTTGASEQ ID NO.136ACGTTGGATGGGTATTGCTAAAAGATCACSEQ ID NO.137ACGTTGGATGGATCAAAGGAAAGCCAGAGCSEQ ID NO.138ACGTTGGATGGAGGATGACCGTTATTCCTGSEQ ID NO.139ACGTTGGATGGCATGACCTTCAAGGCTTTCSEQ ID NO.140ACGTTGGATGGTGTACCCAGAAGACAAGAGSEQ ID NO.141ACGTTGGATGGGAAGGAATAAATGTCTACSEQ IDNO.142ACGTTGGATGCTGATGTGCAGTATCAAGTGSEQ ID NO.143ACGTTGGATGAGGAAGTCCCTATCTTCTTGSEQ ID NO.144ACGTTGGATGCAAGACTACCCAAGATGGGASEQ ID NO.145ACGTTGGATGCTTGAGGCTATTGCTGGAGASEQ ID NO.146ACGTTGGATGGAAAGGGAACATTTGCAATGGSEQ ID NO.147ACGTTGGATGAGTCAGGAGTGAGAGAAGCGSEQ ID NO.148ACGTTGGATGCACACGCACGTTTGCAAACASEQ ID NO.149ACGTTGGATGCTGAATTATCAGAAATCACACSEQ ID NO.150ACGTTGGATGTCCCCAAGACATATTTCCCCSEQ ID NO.151ACGTTGGATGCATATCATTAATCTTGTCTCSEQ ID NO.152ACGTTGGATGGGGAACTACTGTGAAGTGTCSEQ ID NO.153ACGTTGGATGTTAGGCCTGTGCTTCAGCGSEQ ID NO.154ACGTTGGATGGGGAATATTGTATATGCAACSEQ ID NO.155ACGTTGGATGTTCAGACATTTCTGAGAGGCSEQ ID NO.156ACGTTGGATGGGACAAACTGAAGGTTGAGGSEQ ID NO.157ACGTTGGATGCAGAAAAGAATAGGGAGCAGSEQ ID NO.158ACGTTGGATGTCAAGCCAGTGCAAGAAAACSEQ ID NO.159ACGTTGGATGAGGTCTGTAGTCAAATGCACSEQ ID NO.160ACGTTGGATGGCTAACTTTTTTTCTCTCGC序列编号单碱基延伸引物(5’→3’)SEQ ID NO.161AACCCCGCCAGAAAASEQ ID NO.162ATGCACTGGGCTGTTSEQ ID NO.163GGCCCAGAGAAGAAAGSEQ ID NO.164CCCTCCACCACTGAACASEQ ID NO.165TCTATGTGGCTTGTCTTSEQ ID NO.166TCCCTAATCCTTGCTAACSEQ ID NO.167gTGGCCATGTGATTCCTASEQ ID NO.168agCTGCCATTCCCTTTTACSEQ ID NO.169ACAGGTAGCACTGAGGTGASEQ ID NO.170CTCTCCCTATGCACAATAGASEQ ID NO.171aggCCATCTCCATGGGATTCSEQ IDNO.172gggaAGAGGTCCTTGCTAGASEQ ID NO.173gtGCTTAGGTGATACTTTCCTSEQ ID NO.174aagGGTGACAGTGGAAATCATSEQ ID NO.175cCTGCTTATACTTTATCTGCTTSEQ ID NO.176tAAAGAAACAACTCAAGAAAACSEQ ID NO.177cttttTTGACTGCCTTTTGATACSEQ ID NO.178cataAAACAAGATGGATGCTTTASEQ ID NO.179atagcAATGCCACAATCTTTGACTSEQ ID NO.180ttAATCAGTATTTTGAGTATGGTASEQ ID NO.181cccctTAATTCTACCTTGCTTCATGSEQ ID NO.182cttgtGCTGTCATCTCCTGTGAAAASEQ ID NO.183aattaTCTCTTACACTTAATACCCTTSEQ ID NO.184ccgCAAAGAATTAAGGTCCTAATTTTSEQ ID NO.185cccctTGGAATTTGCTTCCTCTAAATCSEQ ID NO.186ggggaCAAGATGACAGAATAGAAAGTTSEQ ID NO.187ccgacGAAGATACGATACACCTATTTTASEQ ID NO.188gatgaCAGTGACCTGTATTTTTGAAATGSEQ ID NO.189AGCACCAACCCTCATSEQ ID NO.190GGTCTGAGCGTGAAASEQ ID NO.191CACATTCCATCCCAGASEQ ID NO.192CATTTTAACGCTGGCASEQ IDNO.193TGGAGAATTCCACAACASEQ ID NO.194TCTTCACCTTCATAGTCCSEQ ID NO.195GTAGGCATTTAGCCAAAASEQ ID NO.196ctacAGGCTAAGCCATCCASEQ ID NO.197AGGTTATGACCATGTGTAASEQ ID NO.198tCTGCATTCTGATACGTTTTSEQ ID NO.199gccTGTCAGACAAATTCGCTASEQ ID NO.200cctccCGATGCTACCCTGATTCSEQ ID NO.201CACAACGTGTAGTGAATTTTAGSEQ ID NO.202accaAATCTCTCTCGAACATACTSEQ ID NO.203gGTGTGTGTTTCTATAAAGTTACSEQ ID NO.204aACATTTTTATGTACTCACGATAASEQ ID NO.205cccaaCCCACTACTCATCTTCTTTASEQ ID NO.206ccaccTACAACTCATAAACATTGCTSEQ ID NO.207ccttGTTTTATTTTAAGGAAACGCASEQ ID NO.208ggcccCATCTGTAACTCTCAAATTCTSEQ ID NO.209agggcGGTGTCTAGAGAACCTATACASEQ ID NO.210ccccCATTTGCTTTTATTGCTAAGATTSEQ IDNO.211ggagtATCAAGTACTGTAAGGTTTTAASEQ ID NO.212cctccCAGATAGTTGGCCACACAATTATSEQ ID NO.213attgTCTTATTATGCATAAGATAACCAASEQ ID NO.214AGCACCAACCCTCATSEQ ID NO.215CTGAGCTGAGGGCATSEQ ID NO.216ATCTCAGGGTCCTCTTSEQ ID NO.217GGGCAGATTCAGGAACSEQ ID NO.218ACGCTGGCACATTTAACSEQ ID NO.219GAGAGCAGTGGAAGTTASEQ ID NO.220CCACTGTGGTAGTCATAASEQ ID NO.221CAGACCCTCTAATCCTCTCSEQ ID NO.222tctGCCATTCCTGGTCAACSEQ ID NO.223tGCCTTGGAACAAGTGTTASEQ ID NO.224ttTTCGTTTTCGTACGTTACSEQ ID NO.225taagGGGCATGACCACATTGSEQ ID NO.226tctTCTTCCCCAATTTCAACTSEQ ID NO.227actatAAACCTGAGACTCGTCSEQ ID NO.228cccccTCAAATCCTGCTTGTCASEQ ID NO.229cGTTTTGGATTCAGACAATAGASEQ ID NO.230cccacGCCCACTCTGCGTACTAASEQ ID NO.231cgTGAGATTTAGGCCTAGTTTAASEQ ID NO.232ccccTGGAACAGTCATATCTCTACSEQ ID NO.233ggACACATGTATTTCTACTGTTTCSEQ ID NO.234gacTGACTAATAGCTGATCCTATAASEQ ID NO.235gggcgTGAGACTAAATGAAGGGTAASEQ ID NO.236ccctaTGCACCAACTGCAGGATTTTTASEQ ID NO.237ccctcGTTTGTCCCACTTTAATTTCTCTSEQ ID NO.238cctcaTTCTAGAATAATAGAGCCATTTTSEQ ID NO.239gctatGGTCACTGAACAAATATTAGACTSEQ ID NO.240aaagATTAAGAATTTGGACAGAAATAAA