[发明专利]固定化乙醛脱氢酶及其制备方法有效
| 申请号： | 201310124414.0 | 申请日： | 2013-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN103224927A | 公开（公告）日： | 2013-07-31 |
| 发明（设计）人： | 马义福;万艳娟;胡永刚;徐凤彩 | 申请（专利权）人： | 珠海市御品堂生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N11/10 | 分类号： | C12N11/10 |
| 代理公司： | 广东秉德律师事务所 44291 | 代理人： | 杨焕军;田学东 |
| 地址： | 519000 广东省*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种固定化乙醛脱氢酶及其制备方法，其中，制备方法包括：1)乙醛脱氢酶溶液的制备；2)将壳聚糖载体用NaHCO3溶液浸洗平衡，抽干，得预处理的壳聚糖载体；3)在所述预处理的壳聚糖载体中加入所述乙醛脱氢酶溶液，在4℃下吸附固定6h，得初步吸附的壳聚糖载体；4)用NaHCO3溶液反复冲洗初步吸附的壳聚糖载体至洗脱液在A280处无光吸收后，抽干，得吸附处理的壳聚糖载体；5)在吸附处理的壳聚糖载体中加入体积浓度为2％的戊二醛在4℃下交联2h，得吸附交联的壳聚糖载体；6)用NaHCO3溶液冲洗吸附交联的壳聚糖载体，抽干，得到即为固定化乙醛脱氢酶。本发明简便易行、成本较低。 | ||
| 搜索关键词： | 固定 乙醛 脱氢酶 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种固定化乙醛脱氢酶的制备方法，其特征在于包括：1)：乙醛脱氢酶溶液的制备：称取2g的粗酶粉，先加入20ml‑40ml的浓度为5mmol/L的NaHCO3溶液进行研磨，然后用浓度为5mmol/L的NaHCO3溶液定容至100mL，4000r/min离心5min‑10min，取上清液于4℃下保存备用；2)：将壳聚糖载体用浓度为5mmol/L的NaHCO3溶液浸洗平衡，抽干，得预处理的壳聚糖载体；3)：在所述预处理的壳聚糖载体中加入所述乙醛脱氢酶溶液，在4℃下吸附固定6h，得初步吸附的壳聚糖载体，其中，所述预处理的壳聚糖载体的质量g与所述乙醛脱氢酶溶液的体积mL之比为1∶2；4)：用浓度为的5mmol/L NaHCO3溶液反复冲洗所述初步吸附的壳聚糖载体至洗脱液在A280处无光吸收后，抽干，得吸附处理的壳聚糖载体；5)：在所述吸附处理的壳聚糖载体中加入体积浓度为2％的戊二醛在4℃下交联2h，得吸附交联的壳聚糖载体，其中，所述吸附处理的壳聚糖载体的质量g与所述戊二醛的体积mL之比为＝1∶4；6)：用浓度为5mmol/L的NaHCO3溶液冲洗所述吸附交联的壳聚糖载体以洗去多余的戊二醛，抽干，得到即为固定化乙醛脱氢酶。
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