[发明专利]用于扩增核糖核酸的方法及分析该方法中RNA或DNA模板的方法有效
| 申请号： | 201310150085.7 | 申请日： | 2013-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN103266103A | 公开（公告）日： | 2013-08-28 |
| 发明（设计）人： | 丁少峰;刘强 | 申请（专利权）人： | 丁少峰;刘强 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 天津市三利专利商标代理有限公司 12107 | 代理人： | 李蕊 |
| 地址： | 美国加州高*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | 本发明提供了用于扩增核糖核酸的方法及分析该方法中RNA模板的方法，开发了一种RNA-PAP的新方法，其可以直接放大RNA模板而无需额外的处理；RNA-PAP为扩增RNA模板带来了一个全新的机理，其中RNA依赖性DNA焦磷酸化反应和RNA依赖性DNA聚合反应是用3'末端阻断性寡核苷酸引物所串联耦合的，由于这种串连耦合，使得RNA-PAP对RNA模板的不匹配性具有高度的选择性，从而提供了高度特异性的RNA模板的扩增；此外，经遗传工程产生的突变体聚合酶具有更高的RNA依赖性DNA焦磷酸化反应和RNA依赖性DNA聚合反应的效率。 | ||
| 搜索关键词： | 用于 扩增 核糖核酸 方法 分析 rna dna 模板 | ||
【主权项】：
用于扩增核糖核酸的方法，其特征在于：是以RNA或DNA为模板合成核酸的方法，包括以下具体步骤：（a）一个3'末端被阻断的寡核苷酸引物即其3'末端有一个不可延伸的核苷酸,并与其互补的RNA模板或DNA模板产生退火；（b）RNA依赖性DNA焦磷酸化反应或DNA依赖性DNA焦磷酸化反应以去除3'末端被阻断引物的阻断剂,从而使其成为3'末端去除阻断的引物；（c）RNA依赖性DNA聚合反应或DNA依赖性DNA聚合反应来延伸其3'末端已去除阻断的引物。
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