[发明专利]一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法无效
| 申请号： | 201310150982.8 | 申请日： | 2013-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN104120159A | 公开（公告）日： | 2014-10-29 |
| 发明（设计）人： | 岑仡;宋宏 | 申请（专利权）人： | 上海三维生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C07K14/53;C07K1/16 |
| 代理公司： | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人： | 张泽纯 |
| 地址： | 上海市浦东新区金桥*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，包括：对rhG-CSF基因工程菌进行发酵培养，然后将培养菌体混悬于裂解液中，制得包涵体；将包涵体进行变性处理，然后用柱层析进行复性，得rhG-CSF复性液；最后进行阳离子层析和凝胶过滤层析，收集得到重组人粒细胞集落刺激因子。采用柱层析复性的方法，简化了操作方式，使重组人粒细胞集落刺激因子的复性收率高于70%；复性液经过阳离子交换和分子筛层析后制备成rhG-CSF的原液。原液电泳纯度达到99%以上，RP-HPLC的纯度达到98%以上，比活性6.6×107IU/mg。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 重组 粒细胞 集落刺激因子 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种重组人粒细胞集落刺激因子的制备方法，包括:（1）对rhG‑CSF基因工程菌进行发酵培养，然后将培养菌体混悬于裂解液中，经超声破碎和离心处理，制得包涵体；（2）将上述包涵体经洗涤和溶解后，进行变性处理，得到变性蛋白溶液；（3）将所得变性蛋白溶液进行稀释，然后用柱层析进行复性处理，得rhG‑CSF复性液；（4）将复性液进行阳离子层析和凝胶过滤层析，收集得到重组人粒细胞集落刺激因子。
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